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绞股蓝鲨烯合成酶基因GpSS1的克隆、序列与表达分析及MeJA对其表达的影响
引用本文:李茹芳,刘世彪,赵娜,韩硕,王慧,路蒙蒙,赵瑞,郭惠红.绞股蓝鲨烯合成酶基因GpSS1的克隆、序列与表达分析及MeJA对其表达的影响[J].中草药,2016,47(15):2713-2720.
作者姓名:李茹芳  刘世彪  赵娜  韩硕  王慧  路蒙蒙  赵瑞  郭惠红
作者单位:北京林业大学生物科学与技术学院, 北京 100083;吉首大学生物资源与环境科学学院 生物系, 湖南 吉首 416000;北京林业大学生物科学与技术学院, 北京 100083;北京林业大学生物科学与技术学院, 北京 100083;北京林业大学生物科学与技术学院, 北京 100083;北京林业大学生物科学与技术学院, 北京 100083;北京林业大学生物科学与技术学院, 北京 100083;北京林业大学生物科学与技术学院, 北京 100083
基金项目:国家自然科学基金资助项目(31260039)
摘    要:目的克隆绞股蓝Gynostemma pentaphyllum鲨烯合成酶基因(GpSS1),进行序列及表达分析,并研究茉莉酸甲酯(Me JA)对其调节的影响。方法基于Gen Bank提供的Gp SS基因序列设计GpSS1引物,利用RT-PCR方法获取GpSS1基因编码区序列;运用Protparam及Tmpred软件预测GpSS1蛋白的理化性质和跨膜结构域;采用Motif Scan及Bio Edit软件分析GpSS1酶催化活性保守区及蛋白多重序列比对;实时荧光定量PCR分析GpSS1基因的表达模式及Me JA对其调节的影响。结果 GpSS1(Gen Bank号为KU363976)编码区长1 254 bp,编码417个氨基酸;GpSS1基因具有3个与该酶催化活性相关的保守区、1个天冬氨酸富含区和1个碳端内质网锚定区。GpSS1基因在幼叶中表达最高,其次是老叶,在根状茎中的表达较低。不同浓度Me JA喷施绞股蓝植株后均引起了GpSS1基因的表达上调,其中50μmol/L的Me JA对GpSS1基因表达的影响最大。GpSS1基因在幼叶和老叶中的表达均呈现出先逐渐上升后有所下降的趋势,但在幼叶中的表达水平高于老叶。结论绞股蓝GpSS1基因的克隆及Me JA对其调控的分析,为进一步研究GpSS1基因的功能和Me JA对其调节的机制,以及为改善绞股蓝皂苷品质或提高其产量提供了科学理论依据。

关 键 词:绞股蓝  三萜皂苷  GpSS1  序列分析  基因表达  茉莉酸甲酯调节
收稿时间:2016/2/25 0:00:00

Gene cloning, sequence, and expression analysis of GpSS1 and its regulation by MeJA in Gynostemma pentaphyllum
LI Ru-fang,LIU Shi-biao,ZHAO N,HAN Shuo,WANG Hui,LU Meng-meng,ZHAO Rui and GUO Hui-hong.Gene cloning, sequence, and expression analysis of GpSS1 and its regulation by MeJA in Gynostemma pentaphyllum[J].Chinese Traditional and Herbal Drugs,2016,47(15):2713-2720.
Authors:LI Ru-fang  LIU Shi-biao  ZHAO N  HAN Shuo  WANG Hui  LU Meng-meng  ZHAO Rui and GUO Hui-hong
Institution:College of Biological Sciences and Biotechnology, Beijing Forestry University, Beijing 100083, China;College of Biology and Environmental Sciences, Jishou University, Jishou 416000, China;College of Biological Sciences and Biotechnology, Beijing Forestry University, Beijing 100083, China;College of Biological Sciences and Biotechnology, Beijing Forestry University, Beijing 100083, China;College of Biological Sciences and Biotechnology, Beijing Forestry University, Beijing 100083, China;College of Biological Sciences and Biotechnology, Beijing Forestry University, Beijing 100083, China;College of Biological Sciences and Biotechnology, Beijing Forestry University, Beijing 100083, China;College of Biological Sciences and Biotechnology, Beijing Forestry University, Beijing 100083, China
Abstract:
Keywords:Gynostemma pentaphyllum (Thunb  ) Makino  triterpenoid saponin  GpSS1  sequence analysis  gene expression  MeJA regulation
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