CagA对幽门螺杆菌诱导胃黏膜上皮细胞分泌IL-8水平的影响

目的：利用小分子干扰RNA（siRNA）探讨CagA在幽门螺杆菌诱导胃黏膜上皮细胞分泌IL-8中的作用。方法：设计5条siRNA,采用电穿孔法转入CagA+幽门螺杆菌NCTC11637,与胃黏膜上皮细胞共培养后测定IL-8水平,并以RT-PCR、Westernblotting法检测穿孔前、后不同时点细菌的CagA表达。采用CagA-株NCTC11639作对照。结果：CagA+NCTC11637诱导胃黏膜上皮细胞分泌IL-8水平明显高于CagA-NCTC11639［（1200.00±32.51)ng/Lvs(100.00±8.58）ng/L］（P<0.01）。siRNAⅢ转化的幽门螺杆菌诱导胃黏膜上皮细胞分泌IL-8水平显著低于转化前［(400.00±17.35)ng/Lvs（1200.00±32.51)ng/L］(P<0.05);siRNAⅢ转化的幽门螺杆菌CagAmRNA水平显著低于转化前,穿孔后6hmRNA水平最低为31.3%(0.270/0.861),抑制率为68.7%。Westernblotting显示siRNAⅢ组CagA蛋白水平低于穿孔前（P<0.01）;其余4条siRNA未见显著变化。结论：CagA在幽门螺杆菌诱导胃黏膜上皮细胞分泌IL-8中起重要作用,小分子干扰RNA可能通过抑制CagA基因表达而减少幽门螺杆菌诱导胃黏膜上皮细胞IL-8的分泌。