Survivin HLA-A2+高亲和性CTL表位的预测及鉴定

目的: 比较bcl 2、白介素 6（interleukin 6,IL 6）、白介素 6受体(interleukin 6 receptor,IL 6R)反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸（antisense phosphorothiate oligodeoxynucleotide, AS PS ODN)对小细胞肺癌细胞株NCI H446细胞增殖及诱导凋亡的作用,初步探讨反义核苷酸技术治疗中靶基因的选择策略。方法：合成反义寡脱氧核苷酸bcl 2 AS PS ODN、IL 6 AS PS ODN、IL 6R AS PS ODN,分别作用于NCI H446细胞株,通过细胞克隆形成实验检测细胞增殖活性的变化,细胞凋亡线粒体流式检测及DNA倍体分析检测细胞凋亡,半定量RT PCR检测相关基因表达水平的变化。结果：（1）bcl 2 AS PS ODN、IL 6 AS PS ODN、IL 6R AS PS ODN均能够抑制肺癌细胞增殖活性和诱导细胞凋亡,其中以IL 6 AS PS ODN抑制作用最强, bcl 2 AS PS ODN次之, IL 6R AS PS ODN作用最弱。（2）3种反义寡脱氧核苷酸均能下调肺癌细胞相应基因的表达水平,其中以IL 6下调幅度最大,达(84.1±5.01）%; bcl 2和IL 6R基因下调幅度相近,分别为(62.6±3.42）%和(60.3±4.45）%。（3）反义核苷酸作用后除了引起自身基因表达下调外,还伴对其他基因表达的调节作用,如IL 6 AS PS ODN作用使bcl 2基因表达下调(32.2±020）%;而bcl 2 AS PS ODN作用使IL 6基因表达上调(74.3±413）%。 结论：IL 6 AS PS ODN较bcl 2 AS PS ODN和IL 6R AS PS ODN能更有效地诱导小细胞肺癌细胞凋亡,IL 6是NCI H446小细胞肺癌反义核苷酸治疗较为合适的靶基因。