| 烟曲霉硫氧还蛋白还原酶重组蛋白的原核表达及抗原性分析 |
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| 引用本文： | 史利宁,邵世和,李芳秋,孔小祥,王仕钦,陆静芬,黄梅,邵海枫. 烟曲霉硫氧还蛋白还原酶重组蛋白的原核表达及抗原性分析[J]. 临床检验杂志, 2011, 29(8): 599-601 |
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| 作者姓名： | 史利宁 邵世和 李芳秋 孔小祥 王仕钦 陆静芬 黄梅 邵海枫 |
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| 作者单位： | 江苏大学基础医学与医学技术学院，江苏镇江 212013/南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所，南京 210002;江苏大学基础医学与医学技术学院，江苏镇江 212013;南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所，南京 210002;南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所，南京 210002;南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所，南京 210002;南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所，南京 210002;南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所，南京 210002;南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所，南京 210002 |
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| 基金项目： | 江苏省科技支撑计划-社会发展项目（BE2009673）；江苏省博士后基金项目（0802032C）。 |
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| 摘 要： | ![]()
摘要：目的：克隆烟曲霉硫氧还蛋白还原酶（thioredoxin reductase，TR）基因并构建原核表达载体，获得烟曲霉TR重组蛋白，并鉴定其抗原性。 方法：用RT-PCR方法从烟曲霉总RNA中扩增出TR cDNA片段，克隆至pMD18-T载体，并转化E.coli JM109。经序列分析证实后，提取重组克隆质粒双酶切获得目的基因，与表达载体pET28a(+)连接，转化E.coli BL21（DE3），筛选重组表达质粒。用异丙基硫代β-D-半乳糖苷（IPTG）诱导重组融合蛋白表达，用SDS-PAGE及免疫印迹法分析重组蛋白质，并用亲和层析柱进行纯化。 结果：构建了含TR全长基因的重组表达质粒，IPTG诱导后可高效表达。免疫印迹结果表明该重组蛋白质可被侵袭性曲霉病患者血清识别。 结论：成功构建了重组表达质粒pET28a(+)/TR，并在大肠埃希菌中获得了高效表达，重组蛋白质具有良好的抗原性，为进一步研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 烟曲霉 硫氧还蛋白还原酶 基因克隆 原核表达 |
| 收稿时间： | 2011-01-20 |
| 修稿时间： | 2011-03-15 |
Prokaryotic expression and antigenic analysis of recombinant thioredoxin reductase GliT of Aspergillus fumigatus |
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| SHI Li-ning,,SHAO Shi-he,LI Fang-qiu,KONG Xiao-xiang,WANG Shi-qin,LU Jing-fen,HUANG Mei,SHAO Hai-feng. Prokaryotic expression and antigenic analysis of recombinant thioredoxin reductase GliT of Aspergillus fumigatus[J]. Chinese Journal of Clinical Laboratory Science, 2011, 29(8): 599-601 |
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| Authors: | SHI Li-ning SHAO Shi-he LI Fang-qiu KONG Xiao-xiang WANG Shi-qin LU Jing-fen HUANG Mei SHAO Hai-feng |
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| Affiliation: | SHI Li-ning1,2,SHAO Shi-he1,LI Fang-qiu2,KONG Xiao-xiang2,WANG Shi-qin2,LU Jing-fen2,HUANG Mei2,SHAO Hai-feng2(1.School of Medical Technology,Jiangsu University,Zhenjiang 212013,Jiangsu,2.Institute of Medical Laboratory Sciences of PLA,Nanjing General Hospital of Nanjing Military Command,Nanjing 210002,China) |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | Aspergillus fumigatus thioredoxin reductase GliT gene cloning prokaryotic expression |
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