Msp对人非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力影响的 实验研究

目的 探讨巨噬细胞刺激蛋白(macrophage stimulating protein, Msp)对人非小细胞肺癌细胞株PC14增殖、迁移和侵袭能力影响的研究。方法 构建Msp编码基因st1 真核表达载体，将st1 导入Msp（-）和RON（-）人非小细胞肺癌细胞株PC14，并用G418筛选出稳定表达的细胞株。通过RT-PCR方法检测已转染st1 载体PC14细胞中st1 的表达，用Western blot检测Msp在PC14、PC14-st1 -pEGFP-N1、PC14-pEGFP-N1中的表达水平，同时检测RON在PC14和RON(+)细胞SKBR-3中的表达情况。通过计算RAW 264.7（小鼠单核巨噬细胞）和SKBR-3细胞在各转染组细胞培养上清液的刺激下穿过Transwell 微孔膜的细胞数来评价Msp的生物学活性。利用MTT法检测Msp对PC14细胞增殖力的影响，采用Transwell小室和基质胶侵袭实验观察Msp对PC14细胞迁移和侵袭能力的影响。结果 转染st1 基因后，形成PC14-st1 -pEGFP-N1，稳定表达st1 mRNA及蛋白，其本身的增殖能力被明显抑制，迁移能力和侵袭能力均较PC14和PC14-pEGFP-N1降低。它还通过旁分泌的方式对RON (+)阳性的癌细胞RAW264.7和SKBR-3的迁移起促进作用。结论 Msp表达可降低人非小细胞肺癌细胞PC14的增殖、迁移和侵袭能力，却对RON (+)阳性的癌细胞迁移通过旁分泌的方式有促进作用。