ENU致大鼠体内Pig-a基因突变的时-效关系和量-效关系研究

目的:建立大鼠体内Pig-a基因突变试验方法,研究N-乙基-N-亚硝基脲(N-ethyl-N-nitrosourea,ENU)诱导的大鼠体内磷脂酰肌醇聚糖A类(phosphatidylinositol glycanclass-A,Pig-a)基因突变的时-效关系和量-效关系,探索该试验整合到重复剂量毒性试验中的可能性。方法:将15只雄性SD大鼠按照体质量随机分为3组:溶媒对照组(PBS,pH=6.0)、ENU低剂量组(20mg/kg)和ENU高剂量组(40mg/kg),灌胃给药,容量均按10mL/kg,每天1次,连续给药3d。分别于给药前1d、给药后第15、30和45天颈静脉取血,分离红细胞,经抗体和核酸染料标记后采用流式细胞仪分析网织红细胞(reticulocyte,RET)、总红细胞(redbloodcell,RBC)Pig-a基因突变率和RET百分率。结果:ENU低、高剂量组大鼠在给药后第15、30和45天的RBC和RETPig-a基因突变率平均值与对照组相比均明显升高(P均0.01),高剂量组约为低剂量组的2~3倍。第15~45天,大鼠体内Pig-a基因突变率保持在较高水平,且呈现剂量反应趋势。而在此期间,RET百分率与对照组的比值约为1。结论:本研究成功建立了大鼠体内Pig-a基因突变流式检测方法,提示该试验可整合至重复剂量毒性试验中。