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PMT和H6H双基因共转化颠茄发根的植株再生
引用本文:杨春贤,周启贵,陈敏,彭梅芳,张婷婷,张磊,廖志华.PMT和H6H双基因共转化颠茄发根的植株再生[J].中草药,2007,38(10):1548-1551.
作者姓名:杨春贤  周启贵  陈敏  彭梅芳  张婷婷  张磊  廖志华
作者单位:1. 西南大学生命科学学院,天然产物与代谢工程实验室,三峡库区生态环境教育部重点实验室,重庆,400715
2. 西南大学药学院,重庆,400715
3. 第二军医大学药学院,生药学教研室,上海,200433
基金项目:国家自然科学基金;重庆市自然科学基金
摘    要:目的获得1,4-丁二胺-氮-甲基转移酶(putrescine N-methyltransferase,PMT)和莨菪碱-6β-羟化酶(hyoscyamine6β-hydroxylase,H6H)双基因共转化的颠茄发根的再生植株。方法选用PMT和H6H双基因共转化的东莨菪碱高产发根单克隆T4,用1/2MS 1.0mg/LNAA固体培养基培养1、5、10d后,转入1/2MS固体培养基中诱导不定芽和不定根,培养条件均为(25±1)℃,55μmol/(m2.s),12h/d。采用PCR扩增检测再生植株的PMT、H6H和NPT-。结果发根在1/2MS 1.0mg/LNAA固体培养基上培养5d后,转入1/2MS固体培养基上培养,60%的外植体能自发长出不定芽,1/2MS 0.1mg/LIBA固体培养基中诱导生根较1/2MS固体培养基强,15d产生的条数平均为9条,形成了完整的再生植株。PCR检测表明所有再生植株均为颠茄的转基因再生植株。结论建立了颠茄转化发根再生体系,为实现颠茄托品烷类生物碱的代谢工程及开展分子育种奠定了基础。

关 键 词:颠茄  1  4-丁二胺-氮-甲基转移酶  莨菪碱-6β-羟化酶  发根  再生
文章编号:0253-2670(2007)10-1548-04
收稿时间:2006/12/31 0:00:00
修稿时间:2006-12-31

Plantlet regeneration for hairy roots of Atropa belladonna by co-transformed PMT and H6H
YANG Chun-xian,ZHOU Qi-gui,CHEN Min,PENG Mei-fang,ZHANG Ting-ting,ZHANG Lei and LIAO Zhi-hua.Plantlet regeneration for hairy roots of Atropa belladonna by co-transformed PMT and H6H[J].Chinese Traditional and Herbal Drugs,2007,38(10):1548-1551.
Authors:YANG Chun-xian  ZHOU Qi-gui  CHEN Min  PENG Mei-fang  ZHANG Ting-ting  ZHANG Lei and LIAO Zhi-hua
Institution:1. Laboratory of Natural Products and Metabolic Engineering, Key Laboratory of Eco-environments in Three Gorges Reservoir Region, Ministry of Education, School of Life Sciences, Southwest University, Chongqing 400715, China ; 2. College of Pharmacy, Southwest University, Chongqing 400715, China; 3. Department of Pharmacognosy, School of Pharmacy, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China
Abstract:
Keywords:
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