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EGCG单用/与CAR-T疗法联合应用对Raji细胞杀伤、THP-1细胞炎症因子mRNA表达抑制作用
作者姓名:史甲儒  姜淇耀  罗志强  于国华  王建勋
作者单位:1.北京中医药大学生命科学学院,北京 102488;2.北京中医药大学生命科学学院,北京 102488;中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室;3.北京中医药大学生命科学学院,北京 102488;深圳北京中医药大学研究院细胞与基因治疗研究所
基金项目:北京市双一流高层次人才科研启动经费项目 ( 9011451310032 )
摘    要:目的 观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)单用/与嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)疗法联合应用对人Burkitt's淋巴瘤细胞株Raji杀伤、人单核细胞白血病细胞系THP-1炎症因子mRNA表达抑制作用.方法 取对数生长期的Raji细胞,并分为4组,对照组为单纯Raji细胞,Raji + CAR-T组加入CAR-T,Raji + EGCG组加入EGCG,Raji + CAR-T + EGCG组加入CAR-T和EGCG,荧光素酶化学发光法和Annexin V-FITC染色法检测各组细胞相对活力及杀伤效率;取对数生长期的人单核细胞白血病细胞(THP-1细胞),并分为对照组、模型组、EGCG组,其中模型组和EGCG组加入LPS(终浓度1 μg/mL)诱导炎症模型,同时EGCG组加入EGCG(浓度为100 μmol/mL)干预,采用实时荧光定量PCR法检测COX-2、IL-6、IL-8、TNF-α mRNA相对表达量.结果 Raji + CAR-T + EGCG组、Raji + EGCG组、Raji + CAR-T组、对照组细胞相对活力分别为52.93±4.61、91.67±6.79、51.26±2.61、100.00±5.45,对照组与其余3组比较,Raji + CAR-T + EGCG组、Raji + EGCG组比较,P均<0.05.Raji + CAR-T组、Raji + EGCG组、Raji + CAR-T + EGCG组的杀伤效率分别为10.29%、16.21%、16.65%,对照组与其余3组比较,Raji + CAR-T组、Raji + CAR-T + EGCG组比较,P均<0.05.EGCG组COX-2、IL-6、IL-8、TNF-α mRNA相对表达量分别为1.49±0.20、2.09±0.91、5.25±0.36、1.07±0.42,模型组分别为7.06±0.72、34.25±9.98、6.97±0.58、6.64±1.71,对照组分别为1、1、1、1,模型组与其余两组比较,P均<0.05.结论 EGCG不仅可以提升CAR-T活力,并减缓其耗竭,同时在不影响CAR-T杀伤能力和效率的前提下,抑制Raji细胞增殖及多种炎症因子表达.

关 键 词:表没食子儿茶素没食子酸酯  嵌合抗原受体T细胞疗法  Burkitt’s淋巴瘤  Raji细胞
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