钙动员诱导人外周血单核细胞分化为树突状细胞的信号转导

目的初步探讨钙离子载体（CI）在体外迅速诱导人外周血单核细胞（PBMC）分化为树突状细胞（DC）的信号转导途径。方法分离健康献血者的PBMC，在体外用人重组粒／巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）和CI培养40h或rhGM-CSF和TNF-α培养5d，部分PBMC用环胞菌素A（CsA）预处理30min后，再加入CI或TNF-α；相差显微镜下观察细胞的形态；流式细胞仪检测细胞表面CD14、CD80、CD86、CD83、HLS-DR等分子的表达；MTT比色法检测其对同种异体T淋巴细胞的刺激增殖作用；凝胶电泳迁移率变动分析（EMSA）检测不同方法培养的细胞其核转录因子-κB（NF-κB）的活化水平。结果健康献血者的PBMC经rhGM-CSF与CI培养40h或rhGM-CSF与TNF-α培养5d，均可获得DC的典型形态和表面分子的表达，包括CD14表达下调，CD80、CD86及HLA-DR等分子表达的上调，以及较强刺激同种异体T淋巴细胞增殖的作用；其中CI诱导的DC其CD80、CD86、CD83、HLA-DR等分子的上调更明显，刺激T淋巴细胞的增殖能力更强。经TNF-α及CI所诱导分化的DC均具有较好的NF-κB活性。但经CI诱导的DC，其形态、表面标志物、对T淋巴细胞的刺激增殖能力及NF-κB的活性，均受到CsA的抑制；而TNF-α所诱导的DC却不受CsA的影响。结论CI比TNF-α更迅速、更高效地诱导PBMC向DC分化的原因，是信号转导途径的不同，但不论上游信号转导途径有何不同，两者最终都通过激活NF-κB诱导细胞的分化。

Calcium mobilization-induced intracellular signaling transduction for generation of dendritic cells from peripheral blood mononuclear cells