miR-26a-5p/环腺苷酸反应元件结合蛋白1分子轴调控脂肪来源干细胞成骨分化的机制研究 |
| |
引用本文: | 林三福,陈守勃,方凯彬,施劲楠,吴文华,王文怀.miR-26a-5p/环腺苷酸反应元件结合蛋白1分子轴调控脂肪来源干细胞成骨分化的机制研究[J].中国修复重建外科杂志,2023(5):615-621. |
| |
作者姓名: | 林三福 陈守勃 方凯彬 施劲楠 吴文华 王文怀 |
| |
作者单位: | 福建医科大学附属第二医院骨科 |
| |
基金项目: | 福建省教育厅中青年教师教育科研项目(JT180201);;福建省泉州市科技计划项目(2018N022S); |
| |
摘 要: | 目的 探讨miR-26a-5p通过调控环腺苷酸反应元件结合蛋白1(cAMP response element binding protein 1,CREB1)对脂肪来源干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs)成骨分化的调控作用及其作用机制。方法 取4只3~4周龄雌性C57BL/6小鼠脂肪组织,采用消化分离法分离培养细胞并传代。经细胞形态学观察以及流式细胞仪检测鉴定其为ADSCs后,取第3代细胞行成骨分化诱导。于诱导培养0、3、7、14 d行茜素红染色观察细胞钙沉积,ALP活性检测,实时荧光定量PCR检测miR-26a-5p和CREB1 mRNA表达,Western blot检测CREB1蛋白及其磷酸化(phospho-CREB1,p-CREB1)水平以及p-CREB1/CREB1。经starBase数据库预测miR-26a-5p和CREB1存在靶向结合位点后,取HEK-293T细胞行双荧光素酶报告基因实验验证靶向关系(以培养48 h后荧光素酶活性表示)。最后将miR-26a-p inhibitor(实验组)及对应阴性对照(对照组...
|
关 键 词: | miR-26a-5p 脂肪来源干细胞 成骨分化 环腺苷酸反应元件结合蛋白1 小鼠 |
|
|