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miR-26a-5p/环腺苷酸反应元件结合蛋白1分子轴调控脂肪来源干细胞成骨分化的机制研究
引用本文:林三福,陈守勃,方凯彬,施劲楠,吴文华,王文怀.miR-26a-5p/环腺苷酸反应元件结合蛋白1分子轴调控脂肪来源干细胞成骨分化的机制研究[J].中国修复重建外科杂志,2023(5):615-621.
作者姓名:林三福  陈守勃  方凯彬  施劲楠  吴文华  王文怀
作者单位:福建医科大学附属第二医院骨科
基金项目:福建省教育厅中青年教师教育科研项目(JT180201);;福建省泉州市科技计划项目(2018N022S);
摘    要:目的 探讨miR-26a-5p通过调控环腺苷酸反应元件结合蛋白1(cAMP response element binding protein 1,CREB1)对脂肪来源干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs)成骨分化的调控作用及其作用机制。方法 取4只3~4周龄雌性C57BL/6小鼠脂肪组织,采用消化分离法分离培养细胞并传代。经细胞形态学观察以及流式细胞仪检测鉴定其为ADSCs后,取第3代细胞行成骨分化诱导。于诱导培养0、3、7、14 d行茜素红染色观察细胞钙沉积,ALP活性检测,实时荧光定量PCR检测miR-26a-5p和CREB1 mRNA表达,Western blot检测CREB1蛋白及其磷酸化(phospho-CREB1,p-CREB1)水平以及p-CREB1/CREB1。经starBase数据库预测miR-26a-5p和CREB1存在靶向结合位点后,取HEK-293T细胞行双荧光素酶报告基因实验验证靶向关系(以培养48 h后荧光素酶活性表示)。最后将miR-26a-p inhibitor(实验组)及对应阴性对照(对照组...

关 键 词:miR-26a-5p  脂肪来源干细胞  成骨分化  环腺苷酸反应元件结合蛋白1  小鼠
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