| 不同启动子指导的HSV1-sr39TK/GCV系统对小鼠淋巴细胞的敏感性研究 |
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| 引用本文： | 高飞,徐开林,潘秀英,鹿群先,杜冰. 不同启动子指导的HSV1-sr39TK/GCV系统对小鼠淋巴细胞的敏感性研究[J]. 医学分子生物学杂志, 2008, 5(2): 124-128. DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2008.02.007 |
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| 作者姓名： | 高飞 徐开林 潘秀英 鹿群先 杜冰 |
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| 作者单位： | 徐州医学院附属医院血液科,江苏省徐州市,221002;徐州医学院附属医院血液科,江苏省徐州市,221002;徐州医学院附属医院血液科,江苏省徐州市,221002;徐州医学院附属医院血液科,江苏省徐州市,221002;徐州医学院附属医院血液科,江苏省徐州市,221002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 , 江苏省高校自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的观察慢病毒载体中不同启动子指导的突变型单纯疱疹病毒1型胸苷激酶(HSV1-sr39TK)基因在小鼠T淋巴细胞内的表达差异,并进一步比较对丙氧鸟苷(ganciclovir,GCV)的敏感性。方法用亚克隆技术将PCR扩增的HSV1-sr39TK基因分别连接至慢病毒载体不同启动子后,然后在HSV1-sr39TK基因后以内部核糖体进入位点(internal ribosome entry sites,IRES)连接绿色荧光蛋白(green fluorescent pro-tein,GFP)报告基因;采用三质粒包装系统包装病毒,将病毒感染刀豆蛋白A(concanavalin,ConA)激活的小鼠淋巴细胞,分别用流式细胞术、RT-PCR法鉴定HSV1-sr39TK和GFP基因在小鼠淋巴细胞的表达,用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法观察感染不同病毒的淋巴细胞对前体药物GCV的敏感性。结果不同启动子指导的HSV1-sr39TK及GFP基因均可在小鼠淋巴细胞表达,巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)启动子驱动表达能力最强,磷酸甘油激酶(phosphoglycerokinase,PGK)启动子最弱。感染含CMV启动子病毒的淋巴细胞对GCV的IC50值最小。结论在小鼠淋巴细胞内CMV启动子驱动的慢病毒载体HSV1-sr39TK基因表达最强,对前体药物GCV敏感性最高。
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| 关 键 词： | 慢病毒载体 丙氧鸟苷 单纯疱疹病毒I型胸苷激酶 淋巴细胞 |
| 修稿时间： | 2007-11-19 |
Killing Effects on Mouse Lymphocytes Mediated by HSV1-sr39TK/GCV System Directed by Different Promoters |
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| GAO Fei,XU Kailin,PAN Xiuying,LU Qunxian,DU Bing. Killing Effects on Mouse Lymphocytes Mediated by HSV1-sr39TK/GCV System Directed by Different Promoters[J]. Journal of Medical Molecular Biology, 2008, 5(2): 124-128. DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2008.02.007 |
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| Authors: | GAO Fei XU Kailin PAN Xiuying LU Qunxian DU Bing |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | lentiviral vector ganciclovir HSV1-sr39TK lymphocyte |
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