丹参酮ⅡA抑制PI3K/AKT/NF-κB通路对炎性软骨细胞的保护作用

目的 研究丹参酮ⅡA对IL-1β诱导炎性软骨细胞的保护作用及PI3K/AKT/NF-κB通路的影响。方法 取SD大鼠10只，分离培养软骨细胞，分为正常组、丹参酮ⅡA（6.25，12.5，25，50 μmol·L^-1）剂量组，培养24 h后CCK8法检测软骨细胞增殖情况。另取软骨细胞分为正常组、IL-1β（10 ng·mL^-1）组和IL-1β+丹参酮ⅡA（6.25，12.5，25，50 μmol·L^-1）组共6组，IL-1β与丹参酮ⅡA共培养24 h。CCK8检测细胞增殖情况，ELISA法检测软骨细胞TNF-α、IL-6、PGE2、NO的含量水平。qRT-PCR和Western blotting检测软骨细胞iNOS、COX-2、collagen-Ⅱ、aggrecan、MMP-13、ADAMTS-5的mRNA和蛋白表达水平及PI3K/AKT/NF-κB通路蛋白表达水平。结果 对于正常软骨细胞，给予（12.5，25，50 μmol·L^-1）丹参酮ⅡA干预24 h可增加细胞增殖；对于IL-1β诱导的炎性软骨细胞，与IL-1β组相比，丹参酮ⅡA（25，50 μmol·L^-1）可增加细胞增殖（P<0.01）。IL-1β+丹参酮ⅡA（12.5 μmol·L^-1）组IL-6、PGE2、NO含量，COX-2、ADAMTS-5的mRNA表达及ADAMTS-5蛋白表达水平显著下降（P<0.05或P<0.01），aggrecan蛋白表达水平上升（P<0.05）；IL-1β+丹参酮ⅡA（25，50 μmol·L^-1）组TNF-α、IL-6、PGE2、NO含量，iNOS、COX-2、MMP-13、ADAMTS-5的mRNA及蛋白表达，p-PI3K、p-AKT及p-P65蛋白表达水平显著下降（P<0.05或P<0.01），collagen-II、aggrecan蛋白表达水平显著上升（P<0.05或P<0.01）。结论 丹参酮ⅡA可有效保护IL-1β诱导的炎性软骨细胞，可通过促进软骨细胞增殖，抑制炎症反应，抑制PI3K/AKT/NF-κB通路，发挥保护作用。