| 壳聚糖-肠三叶因子纳米粒制备与体外转染的实验研究 |
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| 引用本文： | 孙 勇,王良喜,孙曙光,毛学飞,邓向东,潘晓峰,张 方,陈宝君,勒 娟.壳聚糖-肠三叶因子纳米粒制备与体外转染的实验研究[J].南京医科大学学报,2014(8):1034-1039. |
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| 作者姓名： | 孙 勇 王良喜 孙曙光 毛学飞 邓向东 潘晓峰 张 方 陈宝君 勒 娟 |
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| 作者单位： | 徐州医学院附属淮海医院,中国人民解放军第九七医院烧伤科,江苏 徐州 221004;徐州医学院附属淮海医院,中国人民解放军第九七医院烧伤科,江苏 徐州 221005;徐州医学院附属淮海医院,中国人民解放军第九七医院烧伤科,江苏 徐州 221006;徐州医学院附属淮海医院,中国人民解放军第九七医院烧伤科,江苏 徐州 221007;徐州医学院附属淮海医院,中国人民解放军第九七医院烧伤科,江苏 徐州 221008;徐州医学院附属淮海医院,中国人民解放军第九七医院烧伤科,江苏 徐州 221009;徐州医学院附属淮海医院,中国人民解放军第九七医院烧伤科,江苏 徐州 221010;徐州医学院附属淮海医院,中国人民解放军第九七医院烧伤科,江苏 徐州 221011;徐州医学院附属淮海医院,中国人民解放军第九七医院烧伤科,江苏 徐州 221012 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81100252),南京军区医学科研课题重点项目(09Z007),中国人民解放军第九七医院院管课题(YN2012027) |
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| 摘 要： | 目的:构建hITF基因传递系统,检测其细胞转染效果?方法:首先构建肠三叶因子(intestinal trefoil factor,ITF)的真核表达载体,再利用复凝法制备壳聚糖纳米粒,用透射电镜观察纳米粒的形态及大小,并利用HEK293细胞检验纳米粒的转染能力,最后利用RT－PCR和Western blot检测目的基因的转录及表达情况?结果:成功构建出hITF真核表达载体,利用复凝法制备了不同N/P比的壳聚糖纳米粒,透射电镜观察到粒度< 1 000 nm,粒径呈窄分布;荧光显微镜及流式细胞仪检测显示,壳聚糖纳米粒对HEK293细胞的转染率约为80%,和脂质体的转染率基本一致;RT－PCR和Western blot检测说明hITF被成功转录并分泌表达?结论:成功构建了hITF理想的基因传递系统,为壳聚糖介导hITF基因治疗的应用打下基础?
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| 关 键 词： | 人肠三叶因子 壳聚糖 基因治疗 转染 |
| 收稿时间： | 2014/1/16 0:00:00 |
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