具核梭杆菌来源的外膜囊泡对口腔上皮细胞闭合蛋白Claudin-4表达的影响 |
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作者姓名: | 杨成龙 杨蒙 王宇峰 宋晨成 杜观环 唐国瑶 |
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作者单位: | 1. 潍坊医学院口腔医学院;2. 上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔黏膜病科,上海交通大学口腔医学院,国家口腔医学中心,国家口腔疾病临床医学研究中心,上海市口腔医学重点实验室,上海市口腔医学研究所;3. 上海交通大学医学院附属第九人民医院检验科 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(82101008); |
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摘 要: | 目的:探讨具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum, F.n)分泌的外膜囊泡(outer membrane vesicles, OMVs)对人口腔角质形成细胞(human oral keratinocytes,HOK)闭合蛋白Claudin-4表达及其对口腔上皮屏障功能的影响。方法:厌氧条件下培养具核梭杆菌,透析法提取OMVs。采用Nanosight及透射电镜(transmission electron microscopy,TEM)对提取的OMVs进行表征分析。OMVs以不同质量浓度(0~100μg/mL)刺激HOK 12 h,并以100μg/mL OMVs刺激HOK 6、12 h,采用实时转录PCR和蛋白质印迹法分析闭合蛋白Claudin-4在基因和蛋白水平的表达;倒置荧光显微镜观察HOK与OMVs共定位以及Claudin-4蛋白的定位分布。利用Transwell上室体外构建人口腔上皮屏障,采用跨膜电阻测量仪(EVOM2)检测屏障跨上皮电阻(transepithelial electrical resistance, TER),以异硫氰酸荧光素-右旋糖酐(FD-4...
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关 键 词: | 口腔扁平苔藓 上皮屏障功能 具核梭杆菌 外膜囊泡 Claudin-4 |
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