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粉尘螨cDNA文库的构建
引用本文:刘志刚 周珍文 高波 罗时文 陈淑贞 张兆松. 粉尘螨cDNA文库的构建[J]. 中国人兽共患病杂志, 2004, 20(11): 923-925
作者姓名:刘志刚 周珍文 高波 罗时文 陈淑贞 张兆松
作者单位:深圳大学生命科学学院,深圳市微生物基因工程重点实验室,深圳市微生物基因工程重点实验室,深圳市微生物基因工程重点实验室,南京医科大学分子生物学研究所,南京医科大学分子生物学研究所 深圳518060
基金项目:国家八六三计划(No.2002AA214011),国家自然科学基金(No.30271226、30260101),广东省科技计划重点项目(No.2003(104019),深圳市科技计划项目。
摘    要:
目的构建粉尘螨cDNA表达文库。方法提取粉尘螨总RNA和mRNA,以NotIdT18作为引物反转录合成第一链,置换法合成第二链。加EcoRI接头,经NotI酶切后,应用定向克隆技术将相应dscDNA片段插入λExCell/NotI/EcoRI/CIP载体的NotI和EcoRI双酶切位点间,经包装、转染宿主菌,构建成cDNA文库。检测文库库容量和重组效率,并采用PCR方法对插入片段大小进行分析。结果已成功构建一个含4.8×105个重组子的cDNA表达文库,重组率为100%,插入片段大小平均约1.2kb。结论所建文库容量及插入片段大小适合对粉尘螨特异性重组变应原的进一步研究。

关 键 词:粉尘螨  cDNA文库  构建  
文章编号:1002-2694(2004)11-0923-03
收稿时间:2004-11-20

Construction and primary characterization of the cDNA expression library for Dermatophagoides farinae
LIU Zhi gang,ZHOU Zhen wen,GAO Bo,LUO Shi wen,CHEN Shu zhen,ZHANG Zhao shong. Construction and primary characterization of the cDNA expression library for Dermatophagoides farinae[J]. Chinese Journal of Zoonoses, 2004, 20(11): 923-925
Authors:LIU Zhi gang  ZHOU Zhen wen  GAO Bo  LUO Shi wen  CHEN Shu zhen  ZHANG Zhao shong
Abstract:
Keywords:Dermatophagoides farinae  cDNA expression library  characterization  recombinant allergen.
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