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5-氮杂-2’-脱氧胞苷对MDA-MB-231乳腺癌细胞SLIT2基因去甲基化作用及细胞运动能力的影响
引用本文:张姣,付丽,谷峰,马勇杰.5-氮杂-2’-脱氧胞苷对MDA-MB-231乳腺癌细胞SLIT2基因去甲基化作用及细胞运动能力的影响[J].中华实验外科杂志,2012,29(1).
作者姓名:张姣  付丽  谷峰  马勇杰
作者单位:1. 300060 天津市肿瘤防治重点实验室;乳腺癌防治教育部重点实验室;天津医科大学附属肿瘤医院乳腺病理研究室
2. 300060 天津市肿瘤防治重点实验室;乳腺癌防治教育部重点实验室;天津医科大学附属肿瘤医院研究所中心实验室
基金项目:国家自然科学基金资助项目,教育部长江学者与创新团队发展计划资助项目
摘    要:目的 观察5-氮杂-2’-脱氧胞苷( 5-Aza-dc)对恶性乳腺癌MDA-MB-231细胞Slit2启动子的去甲基化作用及细胞运动能力的影响.方法 用5、10、20 μmol/L 5-Aza-dc分别处理MDA-MB-231乳腺癌细胞;噻唑蓝(MTT)比色法筛选能够恢复MDA-MB-231细胞Slit2表达的5-Azadc最适浓度为10 μmol/L;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测对照组和10μmol/L处理组Slit2mRNA的表达;划痕实验和趋化实验检测5-Aza-dc给药后,乳腺癌细胞的非定向与定向运动能力的变化;聚集实验检测5 -Aza-dc对MDA-MB-231细胞间黏附能力的影响.结果 在RT-PCR结果中,对照组和10 μmol/L 5-Aza-dc处理组Slit2/GAPDH的密度比值分别为0.630±0.042和1.307±0.057,表明5-Aza-dc可有效恢复乳腺癌MDA-MB-231细胞Slit2的表达(P<0.05).体外趋化实验显示10 μmol/L 5-Aza-dc处理的MDA-MB-231细胞定向运动能力降低(P<0.01),趋化凶子上皮生长因子(EGF)浓度为10 μg/L时实验组穿过膜的细胞数为49.46±2.92;对照组为99.44±2.54.伤口愈合实验发现10μmol/L 5-Aza-dc处理的MDA-MB-231细胞非定向运动能力降低(P<0.05),24h时实验组运动的距离为(0.330±0.016) mm;对照组为(0.440±0.045) mm.聚集实验显示10 μmol/L 5-Aza-dc处理的MDA-MB-231细胞间黏附能力增加(P<0.01),60 min时实验组聚集指数为0.300±0.028,对照组为0.600±0.034.结论 5-Aza-dc可以使MDA-MB-231乳腺癌细胞Slit2启动子区去甲基化,使Slit2基因表达升高,恢复其抑制肿瘤运动的能力.

关 键 词:乳腺癌  5-氮杂-2’-脱氧胞苷  Slit2  去甲基化  运动

5-Aza-dc induces demethylation in Slit2 promoter gene and inhibits the motility ability of MDA-MB-231 cell line
ZHANG Jiao,FU Li,GU Feng,MA Yong-jie.5-Aza-dc induces demethylation in Slit2 promoter gene and inhibits the motility ability of MDA-MB-231 cell line[J].Chinese Journal of Experimental Surgery,2012,29(1).
Authors:ZHANG Jiao  FU Li  GU Feng  MA Yong-jie
Abstract:
Keywords:Breast carcinoma  5-Aza-dc  Sli2  Demethylation  Motility
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