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TM-TNF-α介导的反向信号下调sTNF-α激活后U937细胞因子mRNA的表达
引用本文:辛利军,李清芬,冯玮,姜晓丹,熊平,徐勇,龚非力,李卓娅. TM-TNF-α介导的反向信号下调sTNF-α激活后U937细胞因子mRNA的表达[J]. 中国免疫学杂志, 2006, 22(9): 797-800,804
作者姓名:辛利军  李清芬  冯玮  姜晓丹  熊平  徐勇  龚非力  李卓娅
作者单位:华中科技大学同济医学院免疫系,武汉,430030
摘    要:
目的:观测TM-TNF-α介导的反向信号对sTNF-α激活后U937细胞因子mRNA的影响,构建TM-TNF-α胞浆段缺失突变体,并进一步验证。方法:sTNF-α激活U937细胞后撤除,加入可溶性TNFR(sTNFRⅠ)激活TM-TNF-α介导的反向信号,用RT—PCR方法检测反向信号对活化后U937细胞因子IL-1β、IL-8 mRNA的影响;采用分子克隆技术构建TM-TNF-α胞浆段缺失突变重组体,采用电穿孔法转染U937,并用Western blot检测蛋白表达。结果:sTNF-α激活U937细胞后撤除,高表达的细胞因子IL-1β、IL-8 mRNA随着时间的延长而逐渐降低;sTNFRⅠ激活的TM-TNF-α介导的反向信号可加速细胞因子mRNA的降解,且使mRNA降解至50%的时间分别由约75、60分钟缩短至约45、35分钟。成功构建TM-TNF—α胞浆段缺失突变重组体pcDNA3.0-△csTM-TNF—α并瞬时转染U937细胞,Western blot结果显示U937细胞膜表面除表达26000的野生型TM-TNF-α蛋白外,还可表达约20000的突变体蛋白。这种缺失胞浆段的突变体蛋白可竞争性抑制反向信号对活化后U937细胞因子mRNA的下调作用。结论:TM-TNF-α介导的反向信号可下调sTNF-α激活后U937细胞因子mRNA的表达;且TM-TNF-α胞浆段为其介导的反向信号所必需。

关 键 词:反向信号  TM-TNF-α  sTNFRⅠ
文章编号:1000-484X(2006)09-0797-05
收稿时间:2004-12-24
修稿时间:2004-12-242005-06-07

Reverse signaling via TM-TNF-α down-regulated the expression of cytokine mRNA in pre-activated U937 cells by sTNF-α
XIN Li-Jun,LI Qing-Fen,FENG Wei,JIANG Xiao-Dan,XIONG Ping,XU Yong,GONG Fei-Li,LI Zhuo-Ya. Reverse signaling via TM-TNF-α down-regulated the expression of cytokine mRNA in pre-activated U937 cells by sTNF-α[J]. Chinese Journal of Immunology, 2006, 22(9): 797-800,804
Authors:XIN Li-Jun  LI Qing-Fen  FENG Wei  JIANG Xiao-Dan  XIONG Ping  XU Yong  GONG Fei-Li  LI Zhuo-Ya
Affiliation:Department of Immunology, Tongji Medical College ,Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430032, China
Abstract:
Keywords:U937
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