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逆转录-荧光实时定量PCR法快速测定肠道病毒71型病毒滴度
引用本文:李剑波,吴洁,高丽美,周康凤,毛卓玥,高孟,庄防成.逆转录-荧光实时定量PCR法快速测定肠道病毒71型病毒滴度[J].国际流行病学传染病学杂志,2017,44(5).
作者姓名:李剑波  吴洁  高丽美  周康凤  毛卓玥  高孟  庄防成
作者单位:1. 浙江省医学科学院病毒病研究所, 杭州,310013;2. 310006,杭州市第十四中学
基金项目:浙江省医学重点学科,浙江省科技计划,浙江省中医药科技计划(2017ZA038).Zhejiang Key Medical Subject,Zhejiang Science and Technology Department Project,Zhejiang Traditional Medical Research Program
摘    要:目的 建立一种肠道病毒71型(EV71)病毒滴度快速测定法.方法 以TCID50法测定的EV71病毒样品作为滴度检测参考品,建立EV71病毒滴度的逆转录-荧光实时定量PCR测定方法.通过滴度参考品和待测病毒样品的Ct值计算待测样品中的病毒滴度,并对该检测法进行特异性、重复性验证.结果 所得检测方法可以用于EV71病毒滴度的快速检测.本测定法具有较好的线性,线性范围为lgTCID50 2.61~8.61,相关系数R2为0.9881;特异性和重复性较好,与TCID50法检测之间具有较好的一致性,变异系数(CV)<5%.结论 所建立的逆转录-荧光实时定量PCR法线性范围广,具有较好的重复性和特异性,可用于EV71样品病毒滴度的快速测定.

关 键 词:逆转录聚合酶链反应  肠道病毒71型  病毒滴度
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