反义表达癌基因c-Ha-ras的逆转录病毒穿梭质粒的体外构建 |
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作者姓名: | 胥薇 邓国仁 刘景梅 |
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作者单位: | 北京市肿瘤防治研究所生化室(胥薇,邓国仁),北京市肿瘤防治研究所生化室(刘景梅) |
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摘 要: | Richard Mann等于1983年把逆转录病毒M-MuLV的cDNA上与病毒包装蛋白质识别、包装有关的一段即cis位点造成缺失,并与pBR322的部分顺序连接后构成重组穿梭质粒pMOV-ψ~-。通过磷酸钙沉淀法将pMOV-ψ~-导入NIH3T 3细胞并整合到NIH3T3基因组上,形成转化细胞株ψ2。由于cis位点的缺失,ψ2细胞株虽然不能释放病毒颗粒M-MuLV,但却能表达出所有逆转录病毒成熟、释放所必需的蛋白质。当在ψ2细胞株中再导入含有cis位点的逆转
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