| rAQP4-M1真核表达载体的构建及在CHO细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 冉建华,唐玲,汪克建,李小松,孙善全. rAQP4-M1真核表达载体的构建及在CHO细胞中的表达[J]. 第三军医大学学报, 2010, 32(16) |
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| 作者姓名： | 冉建华 唐玲 汪克建 李小松 孙善全 |
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| 作者单位： | 400016,重庆,重庆医科大学基础医学院解剖学教研室;400016,重庆,重庆医科大学神经科学研究中心;重庆医科大学附属永川医院神经内科,重庆,402161 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，重庆市自然科学基金 |
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| 摘 要： | ![]()
目的 构建rAQP4-M1基因真核表达载体,建立稳定转染AQP4-M1的CHO细胞系.方法 应用RT-PCR从大鼠脑组织中扩增rAQP4-M1,并将PCR产物双酶切后插入到pcDNA3.1(+)真核表达载体中,经过菌落PCR、双酶切及测序验证的pcDNA3.1(+)/rAQP4-M1质粒通过脂质体转染CHO细胞.G418筛选建立稳定转染rAQP4-M1的CHO细胞系.采用细胞免疫荧光和免疫印迹技术检测rAQP4-M1在该细胞系中的表达.结果 成功构建了pcDNA3.1(+)/rAQP4-M1表达质粒,建立了稳定转染的CHO细胞系.免疫荧光检测结果显示,rAQP4-M1在CHO细胞膜上稳定表达;免疫印迹检测可见34×103处的阳性条带,表明rAQP4-M1在该细胞系中成功表达.蓝绿温和胶电泳技术证实了rAQP4-M23而不是rAQP4-M1参与了正交排列颗粒(orthogonal arrays of particles,OAPs)的形成.结论 rAQP4-M1在CHO细胞系中稳定表达成功,rAQP4-M1未参与OAPs的形成.
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| 关 键 词： | rAQP4-M1 稳定转染 真核表达载体 |
Construction of eukaryotic expression vector of rat AQP4-M1 and its expression in CHO cells |
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| Ran Jianhua,Tang Ling,Wang Kejian,Li Xiaosong,Sun Shanquan. Construction of eukaryotic expression vector of rat AQP4-M1 and its expression in CHO cells[J]. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2010, 32(16) |
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| Authors: | Ran Jianhua Tang Ling Wang Kejian Li Xiaosong Sun Shanquan |
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| Affiliation: | Ran Jianhua1,2,Tang Ling3,Wang Kejian1,Li Xiaosong1,Sun Shanquan1,2 (1Department of Anatomy,College of Basic Medical Sciences,2Neuroscience Research Center,Chongqing Medical University,Chongqing,400016,3Department of Neurology,Yongchuan Hospital,402161,China) |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | rAQP4-M1 |
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