利用SPR检测26肽与β1-肾上腺素受体自身抗体的相互作用

目的 探讨根据β₁肾上腺素受体细胞外第二环（β₁-adrenergic receptor，β₁-AR-EC_Ⅱ）的氨基酸序列合成的26肽与β₁-肾上腺素受体β₁-AR-EC_Ⅱ的单克隆抗体（β₁-adrenergic receptor autoantibodies，β₁-AA）的相互作用。方法 根据人β₁-肾上腺素受体细胞外第二环（β₁-AR-EC_Ⅱ）的氨基酸序列合成26肽；采用杂交瘤细胞融合的方法获得针对β₁-AR-EC_Ⅱ的单克隆抗体（β₁-AA）；利用表面等离子共振（surface plasmon resonance，SPR）检测该合成的26肽与β₁-AA的亲和力；利用乳鼠心肌细胞跳动频率实验验证该合成26肽对β₁-AA的中和作用。结果 提取的β₁-AA可以使乳鼠心肌细胞跳动频率增加（P<0.05），提示该β₁-AA具有生物学活性；合成26肽与β₁-AA结合的亲和力（K_D）为4.44 μmol/L，属于中等强度结合；较β₁-AA组相比，26肽处理后可明显降低心肌细胞跳动频率（P<0.05）。结论 该合成26肽与β₁-肾上腺素受体自身抗体之间存在相互作用，并且可以拮抗β₁-AA引起的乳鼠心肌细胞跳动频率的增加。