| 斑蝥素诱导HCT116细胞形态改变及脱黏附机制 |
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| 引用本文： | 张鑫,赵慧,魏洁,郭君,胡刚,林雅军. 斑蝥素诱导HCT116细胞形态改变及脱黏附机制[J]. 中国实验方剂学杂志, 2019, 25(10): 20-25 |
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| 作者姓名： | 张鑫 赵慧 魏洁 郭君 胡刚 林雅军 |
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| 作者单位： | 北京医院 国家老年医学中心 卫生部老年医学重点实验室, 北京 100730,北京医院 国家老年医学中心 卫生部老年医学重点实验室, 北京 100730,北京医院 国家老年医学中心 卫生部老年医学重点实验室, 北京 100730,北京医院 国家老年医学中心 卫生部老年医学重点实验室, 北京 100730,北京医院 国家老年医学中心 卫生部老年医学重点实验室, 北京 100730,北京医院 国家老年医学中心 卫生部老年医学重点实验室, 北京 100730 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（81671391） |
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| 摘 要： | ![]()
目的:探讨斑蝥素(cantharidin,CTD)引起人结肠癌HCT116细胞形态改变及脱黏附作用的分子机制与抑制肿瘤转移的相关性,为CTD的临床使用提供新依据。方法:将HCT116细胞接种于6孔板后,每孔加入不同浓度CTD (0,2. 5,5,10,15,20μmol·L~(-1))培养7～10 d,使用结晶紫染色液染色,对形成的克隆进行计数及统计分析,确定CTD对HCT116细胞的抑制效果;使用鬼笔环肽(phalloidin)特异性染色检测10μmol·L~(-1)CTD对HCT116细胞聚合态微丝骨架(F-actin)的影响,间接免疫荧光染色法观察CTD作用后整合素蛋白含量的改变;蛋白免疫印迹法分析10μmol·L~(-1)CTD作用前后Rho家族RhoA,Rho B,Rho C,Cdc42,Rac1/2/3蛋白表达量变化,根据实验结果确定RhoA为研究目标蛋白;使用质粒瞬时转染方法构建过表达RhoA的HCT116结肠癌细胞,观察10μmol·L~(-1)CTD对过表达细胞骨架形态及黏附的影响。结果:CTD可引起HCT116结肠癌细胞微丝骨架重构及整合素含量减少; RhoA蛋白是CTD作用后含量变化最大的Rho酶家族成员,构建的RhoA过表达细胞中带绿色荧光的转染细胞比例约为60%,与野生型细胞相比,目标蛋白含量显著增高(P 0. 01),CTD通过降低RhoA含量,逆转这一过表达效应(P 0. 01),对细胞的形态及黏附均产生影响。结论:CTD可通过抑制RhoA蛋白的表达,引起HCT116结肠癌细胞形态改变及与基底的黏附减弱,游离的肿瘤细胞无法锚定于继发部位,从而抑制细胞迁移。
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| 关 键 词： | 斑蝥素 人结肠癌HCT116细胞 细胞骨架 黏附 RhoA |
| 收稿时间： | 2018-12-03 |
Mechanism of Cantharidin-induced Morphological Changes and Dissociation of HCT116 Cells |
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| ZHANG Xin,ZHAO Hui,WEI Jie,GUO Jun,HU Gang and LIN Ya-jun. Mechanism of Cantharidin-induced Morphological Changes and Dissociation of HCT116 Cells[J]. China Journal of Experimental Traditional Medical Formulae, 2019, 25(10): 20-25 |
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| Authors: | ZHANG Xin ZHAO Hui WEI Jie GUO Jun HU Gang LIN Ya-jun |
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| Affiliation: | Key Laboratory of Geriatrics Under Ministry of Health, National Center of Gerontology, Beijing Hospital, Beijing 100730, China,Key Laboratory of Geriatrics Under Ministry of Health, National Center of Gerontology, Beijing Hospital, Beijing 100730, China,Key Laboratory of Geriatrics Under Ministry of Health, National Center of Gerontology, Beijing Hospital, Beijing 100730, China,Key Laboratory of Geriatrics Under Ministry of Health, National Center of Gerontology, Beijing Hospital, Beijing 100730, China,Key Laboratory of Geriatrics Under Ministry of Health, National Center of Gerontology, Beijing Hospital, Beijing 100730, China and Key Laboratory of Geriatrics Under Ministry of Health, National Center of Gerontology, Beijing Hospital, Beijing 100730, China |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | cantharidin HCT116 cell cytoskeleton cell adhesion RhoA |
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