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转人4-1-BBL口腔鳞状细胞癌体外诱导特异性抗肿瘤免疫的研究
引用本文:孙顺涛,杨宏宇,罗娟,储眉,张淼,黄冬兰.转人4-1-BBL口腔鳞状细胞癌体外诱导特异性抗肿瘤免疫的研究[J].中华口腔医学杂志,2009,44(4).
作者姓名:孙顺涛  杨宏宇  罗娟  储眉  张淼  黄冬兰
作者单位:北京大学深圳医院口腔颌面外科,广东深圳,518036
基金项目:国家自然科学基金,广东省自然科学基金,深圳市卫生局科技计划项目 
摘    要:目的 构建转染人口腔鳞状细胞癌细胞株4-1-BBL基因,探讨其体外诱导抗肿瘤免疫的能力.方法 通过脂质体法将重组载体pEGFP-4-1-BBL转染人口腔鳞状细胞癌细胞Tca8113,经G-418筛选及有限稀释后获得稳定高表达克隆,分别用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法检测转染细胞中人4-1-BBL mRNA和蛋白的表达.制备肿瘤细胞疫苗.用淋巴细胞分离液分离纯化人外周血T淋巴细胞,用抗CD-3单抗预处理T细胞后,与转染及未转染人4-1-BBL的Tca8113疫苗混合培养.用CCK-8比色法检测细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)的杀伤活性;锥虫蓝计数法检测T细胞增殖,酶联免疫吸附实验检测培养上清液中自细胞介素(IL)-2、干扰素γ分泌水平.结果 转基因Tca8113细胞能够稳定高表达人4-1-BBL.与野生型的Tca8113细胞相比较,转染人4-1-BBL的Tca8113细胞PCR扩增产物的大小约271 bp,能够显著增强T细胞增殖,促进IL-2、干扰素γ分泌,并能有效地诱导CTL产生对Tca8113细胞的特异性杀伤作用.结论 转染4-1-BBL基因既能增强野生型Tca8113细胞的免疫原性,也能诱导T细胞产生有效的抗肿瘤免疫应答.

关 键 词:  鳞状细胞  基因疗法  细胞系  肿瘤

Transgenic 4-1-BB ligand therapy induces tumor specific immune response in oral squamous cell carcinoma
SUN Shun-tao,YANG Hong-yu,LUO Juan,CHU Mei,ZHANG Miao,HUANG Dong-lan.Transgenic 4-1-BB ligand therapy induces tumor specific immune response in oral squamous cell carcinoma[J].Chinese Journal of Stomatology,2009,44(4).
Authors:SUN Shun-tao  YANG Hong-yu  LUO Juan  CHU Mei  ZHANG Miao  HUANG Dong-lan
Abstract:
Keywords:Carcinoma  squamous cell  Gene therapy  Cell line tumor
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