鸡B淋巴细胞cDNA T7噬菌体表达文库的构建与鉴定 |
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作者姓名: | 张改平 张红 郭军庆 王选年 乔松林 郝慧芳 王丽 |
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作者单位: | 1. 河南省农业科学院,河南省动物免疫学重点实验室,河南,郑州,450002 2. 河南省农业科学院,河南省动物免疫学重点实验室,河南,郑州,450002;河南教育学院,河南,郑州,450003 3. 浙江大学,浙江,杭州,310029 4. 河南科技学院,河南,新乡,453003 |
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摘 要: | 目的:构建鸡B淋巴细胞cDNAT7噬菌体表达文库并对文库质量进行鉴定。方法:利用oligo(dT)-纤维素亲和层析从SPF雏鸡法氏囊细胞制备mRNA,合成的双链cDNA定向克隆到T7EcoR I/HindIII载体臂,包装并构建cDNA表达文库。对文库进行滴度测定和重组子测定。扩增文库并进行PCR鉴定插入序列的长度及分布。结果:文库初始滴度为5×107pfu/mL,扩增后滴度达到1.88×1010pfu/mL。插入片段平均长度1440bp,主要分布在750~2000bp之间。结论:构建的鸡B淋巴细胞cDNAT7噬菌体表达文库具有很高的质量,为进一步研究鸡B细胞发育以及传染性法氏囊病毒(IBDV)的分子致病机制奠定了实验基础。
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关 键 词: | 鸡B细胞 T7噬菌体 cDNA表达文库 |
文章编号: | 1007-8738(2007)12-1186-03 |
收稿时间: | 2007-05-08 |
修稿时间: | 2007-05-31 |
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