pSi2.1-G9a-siRNA 诱导人胆管癌细胞RASSF1A 基因脱甲基化 |
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引用本文: | 陈勇军,罗剑,陈波,李宏,王剑明,邹声泉. pSi2.1-G9a-siRNA 诱导人胆管癌细胞RASSF1A 基因脱甲基化[J]. 中华实验外科杂志, 2008, 25(10) |
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作者姓名: | 陈勇军 罗剑 陈波 李宏 王剑明 邹声泉 |
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作者单位: | 华中科技大学同济医学院附属同济医院普外科,武汉,430030 |
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基金项目: | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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摘 要: | 目的 分析组蛋白甲基转移酶Gga特异性siRNA真核表达质粒pSi2.1-G9a-siRNA对人胆管癌细胞株QBC939中RASSF1A基因启动子甲基化及其表达的影响,探讨组蛋白甲基化和DNA甲基化的关系.方法 构建pSi2.1-G9a-siRNA真核表达质粒并转染QBC939细胞,甲基化特异性PCR(MS-PCR)检测RASSF1A启动子甲基化状态的改变,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察RASSF1A mRNA水平变化,Western blot检测RASSF1A蛋白表达.结果 转染pSi2.1-G9a-siRNA后,QBC939细胞中RASSF1A启动子由甲基化状态转变为非甲基化状态;RT-PCR和Western blot结果 显示转染组细胞中分别出现RASSF1A基因的DNA条带(280 bp)和蛋白质条带(40×103),而转染前没有相应条带出现.结论 pSi2.1-G9a-siRNA质粒能够诱导QBC939中RASSF1A启动子去甲基化并恢复表达,提示DNA甲基化在一定程度上受组蛋白甲基化的调控.
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关 键 词: | 胆管癌 甲基化 |
Demethylation of RASSF1 A gene induced by pSt2.1-G9a-siRNA plasmid in cholangiocarcinoma cells |
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Abstract: | |
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Keywords: | RASSFIA |
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