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稳定表达乙型肝炎病毒X和MicroRNA-21基因肝细胞株的构建方法研究
引用本文:舒涛,丁彦,肖丽霞,谢斌辉.稳定表达乙型肝炎病毒X和MicroRNA-21基因肝细胞株的构建方法研究[J].实用心脑肺血管病杂志,2014(10):26-27.
作者姓名:舒涛  丁彦  肖丽霞  谢斌辉
作者单位:1. 赣南医学院第一附属医院消化科, 江西省赣州市,341000
2. 赣南医学院第一附属医院呼吸科, 江西省赣州市,341000
3. 赣南医学院第一附属医院内分泌科, 江西省赣州市,341000
4. 赣南医学院第一附属医院 普外科, 江西省赣州市,341000
基金项目:赣州市指导性科技计划;江西省自然科学基金(2012ZBA205001);江西省科技厅支撑计划项目
摘    要:目的探讨稳定表达乙型肝炎病毒X(HBVX)和MicroRNA-21基因肝细胞株的构建方法。方法应用LE培养基对大鼠肝细胞株进行培养,将pcDNA 3.1-HBVX质粒中的HBVX序列作为实验模板,采用PCR法对获得的目的基因HBVX片段进行扩增,构建稳定表达的HBVX和MicroRNA-21基因肝细胞株。PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后观察HBVX基因克隆结果,鉴定pcDNA 3.1(+)/HBVX重组质粒和MicroRNA-21质粒。结果 PCR产物HBVX基因片段中存在全部HBVX基因编码序列;RT-PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后可见长度为300 bp的MicroRNA-21前体片段。结论本研究成功构建了稳定表达HBVX和MicroRNA-21基因肝细胞株,为临床进行深入研究提供了实验基础。

关 键 词:病毒  乙型肝炎  微RNAs  MicroRNA-21基因  肝细胞株
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