| 福氏志贺菌ipaB基因的克隆表达及免疫原性研究 |
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| 引用本文： | 王国富,薛士鹏,白丽,吴利先.福氏志贺菌ipaB基因的克隆表达及免疫原性研究[J].实用医学杂志,2012,28(19):3183-3185. |
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| 作者姓名： | 王国富 薛士鹏 白丽 吴利先 |
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| 作者单位： | 云南大理学院基础医学院微生物学教研室, 云南省大理市,671000 |
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| 基金项目： | 云南省教育厅基金重点项目(编号:09Z0078) |
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| 摘 要： | 构建福氏志贺菌ipaB基因的原核表达载体,诱导表达并纯化.探讨重组蛋白IpaB经口服免疫小鼠后,机体产生的免疫应答.方法:用PCR扩增ipaB目的基因,克隆至pQE-30表达载体中,转化宿主菌DH5α,经IPTG诱导表达蛋白IpaB;Western blot分析其抗原性.纯化后灌胃免疫小鼠,ELISA法检测血清IgG、IgA、小肠黏液sIgA和粪便sIgA.结果:ipaB基因全长1 743 bp.经SDS-PAGE分析相对分子量(Mr)约为64 000.Western blot分析能与福氏志贺菌全菌抗血清反应.免疫小鼠后,血清IgA、IgG,粪sIgA,肠黏液sIgA明显高于对照组(P＜0.01).结论:成功构建了ipaB基因的原核表达载体并能高效表达,纯化后口服免疫可有效诱导黏膜免疫应答,产生高水平的sIgA,发挥局部黏膜免疫作用,为进一步研究细菌性痢疾的疫苗和发病机制奠定基础.
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| 关 键 词： | 志贺菌 弗氏 ipaB基因 克隆 表达 免疫原性 |
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