血清蛋白质组双向凝胶电泳技术优化 |
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作者姓名: | 张明顺 李雪华 兰晓霞 栾大伟 赵化冰 王世鑫 |
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作者单位: | 天津武警医学院天津市职业与环境危害生物标志物重点实验室,天津300162 |
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摘 要: | 目的建立稳定的人血清蛋白质组双向凝胶电泳(2-DE)技术体系,提高人血清蛋白2-DE图谱的分辨率和重复性。方法采用固相pH梯度(IPG)等电聚焦(IEF)为第一向、SDS-PAGE垂直电泳为第二向的双向电泳技术,对血清蛋白质样品制备、上样量、IPG胶条选择、等电聚焦和SDS-PAGE垂直电泳程序及参数等进行了比较和优化。结果两样品经过3次重复,还原烷基化蛋白质斑点数(678±32)个,非还原烷基化蛋白质斑点数(358±26)个,还原烷基化分离较好,电泳图谱更清晰。结论还原烷基化处理能提高血清蛋白质2-DE的分辨率,该方法也可对其它蛋白质样品的制备和双向电泳提供借鉴作用。
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关 键 词: | 血清蛋白质组 双向凝胶电泳 |
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