河豚毒素单用及与indoxacarb联合应用的镇痛抗炎作用

目的:观察河豚毒素单用及河豚毒素与indoxacarb联合应用的镇痛抗炎作用。方法:实验于2004-09/2005-01在北京大学医学部神经精神药理实验室完成。选择ICR小鼠240只,按随机数字表法分为24组,每组10只。①醋酸扭体实验:110只小鼠分为阴性对照组、阳性对照组(吗啡,5mg/kg)、单用河豚毒素组(0.79,0.39,0.19μg/kg)、联合给药组犤河豚毒素(0.19μg/kg) indoxacarb(1.4,2.8,28mg/kg),河豚毒素(0.19,0.39,0.79μg/kg) indoxacarb(5.6mg/kg)犦。给药40min后,腹腔注射致痛剂6g/L冰醋酸溶液(0.01mL/g)。观察并记录15min内小鼠扭体反应次数。扭体抑制率(%)=(阴性对照组平均扭体次数-给药组平均扭体次数)/阴性对照组平均扭体次数×100%。②甲醛实验:50只小鼠分为阴性对照组、阳性对照组(吗啡,5mg/kg)、单用河豚毒素组(0.19μg/kg)、联合给药组犤河豚毒素(0.19μg/kg) indoxacarb(1.4,2.8mg/kg)犦。给药40min后,小鼠右后足背皮下注射致痛剂9.2g/L甲醛(生理盐水配制)20μL/只。将小鼠舔、咬右爪的时间长度作为疼痛反应的指标。观察并记录0～5min,15～30min反应时间。抑制率(%)=(阴性对照组平均反应时间-给药组平均反应时间)/阴性对照组平均反应时间×100%。注射甲醛4h后,将小鼠断头处死,之后自膝关节切脚,称重,比较左右足差异,以此代表炎症程度。③坐骨神经慢性轻度结扎损伤实验:80只小鼠分为阴性对照组、阳性对照组(吗啡,5mg/kg)、单用河豚毒素组(0.19,0.39,0.79μg/kg)、联合给药组犤河豚毒素(0.19μg/kg) indoxacarb(1.4,2.8,5.6mg/kg)犦。75mg/kg戊巴比妥钠腹腔注射麻醉小鼠。用细铜丝在坐骨神经上结扎2次。在术前及术后第1,3,5,7,9,11,13天测定热板潜伏期。第15天给药后15,30,45,60min测定小鼠热板潜伏期。结果:纳入动物240只,均进入结果分析。①单独使用河豚毒素(0.19,0.39,0.79μg/kg),扭体抑制率分别为22.2%,31.3%,39.2%,其抑制率与浓度存在剂量依赖关系。将河豚毒素(0.19μg/kg)与不同浓度的indoxacarb联合给药发现,扭体抑制率均显示升高趋势,达到38.6%,46.1%,50.6%,65.3%。②在早期(0～5min),单独使用河豚毒素(0.19μg/kg)能够减少小鼠舔脚时间,河豚毒素与indoxcarb(1.4,2.8mg/kg)两者联合给药显著减少小鼠舔脚时间,抑制率达到49.3%,50.2%,与吗啡的镇痛强度相差不多(抑制率为57.5%)。在晚期(15～30min),单独使用河豚毒素(0.19μg/kg)能够显著减少小鼠舔脚时间,将河豚毒素与indoxacarb(1.4,2.8mg/kg)两者联合给药,其作用极其显著,抑制率高达97.2%,92.4%,远远超过吗啡的镇痛强度(抑制率为79.7%)。③单独使用河豚毒素(0.19μg/kg)能够显著增强抗炎活性,抑制率为66.3%;将河豚毒素(0.19μg/kg) indoxacarb(1.4,2.8mg/kg)两者联合用药,其作用极其显著,抑制率高达75.2%,124.2%,远远超过吗啡的抗炎活性(抑制率仅为28.7%),而吗啡与阴性对照组相比差异无显著性意义。④单独使用河豚毒素(0.19μg/kg)能够显著增强热板潜伏期的变化率(P<0.05),能显著缓解结扎坐骨神经引起的小鼠痛觉过敏现象。将河豚毒素(0.19μg/kg) indoxacarb(1.4,2.8,5.6mg/kg)两者联合用药,未看到显著的热板潜伏期的变化。结论:河豚毒素具有一定镇痛作用,能够抑制甲醛引起炎症性疼痛和水肿;河豚毒素联合小剂量indoxacarb具有协同镇痛抗炎作用。

Analgesic and anti-inflammatory effects of tetrodotoxin alone and tetrodotoxin combined with indoxacarb