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突变型人白细胞介素-2基因在大肠杆菌中的表达
引用本文:左爱军,梁东春,刘新宇,郭刚,张镜宇.突变型人白细胞介素-2基因在大肠杆菌中的表达[J].天津医药,2005,33(11):719-721.
作者姓名:左爱军  梁东春  刘新宇  郭刚  张镜宇
作者单位:300070,天津市内分泌研究所
摘    要:目的:建立突变型人白细胞介素-2(rhIL-2)基因大肠杆菌表达系统,为rhlL-2的生产及临床应用奠定基础。方法:自人胎盘组织中提取总RNA,逆转录PCR(RT-PCR)扩增突变型人IL-2基因cDNA,通过对下游引物的设计将编码125位半胱氨酸(c125)的密码子TGT更改为编码丝氨酸的密码子TCT。构建表达型重组质粒pBV-IL-2,温度诱导表达.表达产物行SDS一聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)及WesternBlot鉴定。结果:DNA序列分析证实,重组质粒pBV-IL-2含有突变型人IL-2编码序列及正确的开放读码框架。SDS-PAGE显示,诱导表达碎菌后的沉淀中有分子质量大小约为16.5ku的外源蛋白产生。经Western印迹(WesternBlot)证明为rhlL-2。结论:成功构建了突变型人白细胞介素-2大肠杆菌表达系统。表达产物主要以包涵体的形式存在于碎菌后的沉淀中。

关 键 词:突变  白细胞介素2  大肠杆菌  基因表达  白细胞介素-2基因  大肠杆菌表达系统  突变型  WesternBlot  SDS-PAGE  人白细胞介素-2
收稿时间:11 25 2004 12:00AM
修稿时间:2004-11-252005-05-20

Expression of a Mutational Human Interleukin-2 Gene in E.coli
ZUO Aijun,LIANG Dongchun,LIU Xinyu,GUO Gang,ZHANG Jingyu.Expression of a Mutational Human Interleukin-2 Gene in E.coli[J].Tianjin Medical Journal,2005,33(11):719-721.
Authors:ZUO Aijun  LIANG Dongchun  LIU Xinyu  GUO Gang  ZHANG Jingyu
Institution:Institute of Endocrinology, Tianjin 300070,China
Abstract:
Keywords:mutation  interleukin-2  escherichia coli  gene expression
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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