RNAi沉默livin基因表达对胶质瘤U251细胞增殖的影响 |
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引用本文: | 兰胡翔,霍钢,郑履平. RNAi沉默livin基因表达对胶质瘤U251细胞增殖的影响[J]. 重庆医科大学学报, 2010, 35(8) |
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作者姓名: | 兰胡翔 霍钢 郑履平 |
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作者单位: | 重庆医科大学附属第一医院神经外科,重庆,400016;重庆医科大学附属第一医院神经外科,重庆,400016;重庆医科大学附属第一医院神经外科,重庆,400016 |
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摘 要: | 目的:通过RNA干扰(RNA interference,RNAi)阻断胶质瘤U251细胞中livin基因的表达,研究livin基因沉默后对细胞生长和细胞凋亡的影响.方法:将合成的DNA正义链及反义链变性、退火,形成的双链DNA与pSilencer2.0线性质粒以T4DNA连接酶连接,重组质粒经酶切鉴定后,用脂质体法转染胶质瘤U251细胞,通过RT-PCR、免疫印迹检测干扰效果.MTT法检测细胞生长的影响,流式细胞仪检测转染后胶质瘤U251细胞的凋亡变化.结果:酶切证实设计合成的DNA片段已正确插入载体.RT-PCR、免疫印迹检测实验表明:pSilencer2.0-liv1、pSilencer2.0-liv2重组载体均能有效地阻断胶质瘤U251细胞中livin基因的表达,使livin基因在mRNA和蛋白水平上的表达明显下调(P<0.01),后者抑制效果更佳.转染后的U251细胞生长速度明显变慢.转染pSilencer2.0-1iv2实验组细胞的凋亡增加了17.0%.结论:重组真核载体能有效抑制U251细胞的livin表达,抑制细胞的增殖,诱导细胞凋亡.
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关 键 词: | RNA干扰 livin 胶质瘤细胞 |
Effects of RNAi-silenced Iivin gene on glioma cell lines U251 |
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Abstract: | |
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Keywords: | livin |
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