| 小鼠趋化因子COL19Ig融合蛋白表达载体的构建、表达及鉴定 |
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| 引用本文： | 奉友刚,曾甫清,王光明,李爱玲,郝杰,李翀,袁国红,高翔,谢蜀生.小鼠趋化因子COL19Ig融合蛋白表达载体的构建、表达及鉴定[J].现代免疫学,2006,26(4):331-335. |
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| 作者姓名： | 奉友刚 曾甫清 王光明 李爱玲 郝杰 李翀 袁国红 高翔 谢蜀生 |
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| 作者单位： | [1]华中科技大学同济医学院附属协和医院泌尿外科研究所,武汉430022 [2]北京大学医学部免疫学系,北京100083 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金重点资助项目（39830340） |
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| 摘 要： | 通过特异引物扩增出去掉终止密码的mCCL19编码序列，经酶切、亚克隆、拼接构建了真核表达载体pcDNA3．1-CCL19Ig，酶切和测序鉴定插入序列；将重组质粒转染CHO细胞进行体外表达，通过RT—PCR、Western blot鉴定目的基因的表达，利用趋化小室法测趋化活性。结果测序证实重组表达载体含mCCL19编码序列和人IgGI Fc段序列，其序列分别与GenBank中公布序列比对一致，IgG1-Fc段读码框未发生改变；Western blot结果证实转染了pcDNA3．1-mCEL19Ig的CHO细胞培养上清中有相对分子质量为38000的融合蛋白mCCL19Ig表达；体外趋化实验表明融合蛋白mCCL19Ig对小鼠脾细胞有趋化活性，且呈剂量依耐关系。
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| 关 键 词： | 趋化因子 CCL19 重组融合蛋白 基因表达 趋化活性 |
| 文章编号： | 1001-2478（2006）04-0331-05 |
| 收稿时间： | 2005 |
| 修稿时间： | 2006-04-17 |
Contruction and expression of eukaryotic expression vector pcDMA3. 1- mCCL19Ig containing mouse chemokine 19 and human IgG1-Fc fragment fusion gene |
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| FENG You-gang , ZENG Fu-qing , WANG Guang-ming , LI Ai-ling , HAO Jie , LI Chong , YUAN Guo-hong, GAO Xiang, XIE Shu-sheng.Contruction and expression of eukaryotic expression vector pcDMA3. 1- mCCL19Ig containing mouse chemokine 19 and human IgG1-Fc fragment fusion gene[J].Current Immunology,2006,26(4):331-335. |
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| Authors: | FENG You-gang ZENG Fu-qing WANG Guang-ming LI Ai-ling HAO Jie LI Chong YUAN Guo-hong GAO Xiang XIE Shu-sheng |
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| Institution: | 1. Department of Urology, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430022, China; 2. Department of Immunology, Peking University, Health Science Center, Beijing 100083, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | chemokine CCL19 recombinant fusion protein gene expression chemotactic activity |
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