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重组人透明带3肽段rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348诱发顶体反应及其机制
引用本文:倪崖 李坤 徐万祥 宋力雯 姚康寿 张欣宗 黄荷凤 张艳铃 石其贤. 重组人透明带3肽段rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348诱发顶体反应及其机制[J]. 浙江省医学科学院学报, 2007, 18(3): 1-11
作者姓名:倪崖 李坤 徐万祥 宋力雯 姚康寿 张欣宗 黄荷凤 张艳铃 石其贤
作者单位:[1]浙江省医学科学院生殖生理实验室,杭州310013 [2]温州医学院检验医学系,杭州310013 [3]上海市计划生育研究所,杭州310013 [4]浙江省计划生育研究所,杭州310013 [5]浙江大学妇产科医院,杭州310013
基金项目:浙江省自然科学基金(N0.Y204490),浙江省医学卫生科学研究基金(N0.2004A003),上海市人口计生委基金(N0.03JG05014),国家“973”项目(2006CB504002).
摘    要:
目的探讨大肠杆菌重组表达的rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348生物学特性和功能,研究rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348能否诱发人精子顶体反应及其相关机制。方法rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348诱发人精子顶体反应用金霉素染色法进行评价,同时研究了G特异蛋白抑制剂白日咳毒素(PTX)、钙离子螯合剂EGTA和T型钙通道抑制剂pimozide对rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348诱发人精子顶体反应的影响;同时用荧光分光光度计监测rhuZP3a^22-176或rhuZP3b^177-348刺激获能精子胞内钙([Ca^2+]i)浓度的变化。结果不同浓度的rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348均能诱导人精子AR,其中rhuZP3a^22-176诱导人精子AR呈浓度依赖方式。PTX、EGTA和pimozide可以分别抑制rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348诱发的顶体反应。rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348诱发的顶体反应是由于刺激获能人精子[Ca^2+]i升高所致,但rhuZP3a^22-176诱发[Ca^2+]i升高的方式与rhuZP3b^177-348诱发[Ca^2+]i升高方式不尽相同,rhuZP3a^22-176只能引起[Ca^2+]i升高,而rhuZP3b^177-348既有[Ca^2+]i升高,又伴有持续升高。上述精子[Ca^2+]i升高可被EGTA和pimozide抑制。结论rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348通过激活G蛋白使胞外钙通过T型钙通道内流促使[Ca^2+]i上升,从而引起精子顶体反应,这与人类天然ZP3诱导顶体反应作用相似。

关 键 词:人精子 G蛋白 钙通道 百日咳毒素 金霉素荧光染色法

The Acrosome Reaction Induced by Recombinant Human Zona Pellucida 3 Peptides rhuZP3a^22-176 and rhuZP3b^177-348 and Their Mechanism
Ni Ya, Li Kun, Xu Wan-xiang, et al. The Acrosome Reaction Induced by Recombinant Human Zona Pellucida 3 Peptides rhuZP3a^22-176 and rhuZP3b^177-348 and Their Mechanism[J]. Acta Academiae Medicinae Zhejiang, 2007, 18(3): 1-11
Authors:Ni Ya   Li Kun   Xu Wan-xiang   et al
Affiliation:Department of Reproductive Physiology, Zhejiang Academy of Medical Sciences, Hangzhou, 310013
Abstract:
Keywords:Human sperm  Pertussis toxin  Intracellular calcium   G protein   Calcium channel   Chlortetracycline
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