动脉平滑肌细胞和心肌细胞钾通道的膜片钳全细胞记录技术

目的：介绍一种动脉平滑肌、心室肌细胞急性酶分离方法，并在该分离技术的基础上采用膜片钳全细胞记录方式研究细胞钾离子通道的特性。方法：采用胶原酶Ⅰ(1mg／ml)、木瓜蛋白酶(5mg／ml)消化分离大鼠肺内动脉平滑肌细胞；用链霉蛋白酶E(1mg／ml)、胶原酶Ⅰ(1mg／ml)消化分离大鼠尾动脉平滑肌细胞；用链霉蛋白酶E(0．5mg／ml)灌流消化、分离得到豚鼠心室肌细胞。结果：以上分离的细胞数量多，形态正常，胞壁光滑完整，活性好。于4℃无钙液中保存，8h内可用于膜片钳全细胞记录。记录出的外向电流可被钾通道阻断剂CsCl及TEA所阻断。结论：用酶急性分离的动脉平滑肌和心室肌细胞应用于膜片钳研究中具有快速、经济、简便易行等优点。

A technique of whole-cell recording for studying potassium channels in isolated cells from artery and ventricle of heart