| 2种重组真核蛋氨酸酶原核体系表达及活性比较 |
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| 引用本文： | 田腊梅,任小丽,胡振良,曾红静,田长富.2种重组真核蛋氨酸酶原核体系表达及活性比较[J].昆明医学院学报,2012,33(5):11-14. |
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| 作者姓名： | 田腊梅 任小丽 胡振良 曾红静 田长富 |
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| 作者单位： | 昆明医科大学生物医学工程研究中心基因与蛋白质工程研究室,云南,昆明,650500 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目，云南省科技厅重点基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的构建2种真核L-蛋氨酸γ-裂解酶(MGL1 MGL2)的高效原核表达载体,诱导表达及纯化,比较活性差异.方法通过分子克隆技术构建2种重组表达质粒pGEX-4T-1-MGL1,pGEX-4T-1-MGL2;重组质粒转化感受态大肠杆菌Dh5α,诱导表达纯化蛋氨酸酶.结果构建了高效表达载体pGEX-4T-1-MGL1,pGEX-4T-1-MGL2;pGEX-4T-1-MGL1表达的酶纯度为82.5%,活性为0.505 2 IU/mg,pGEX-4T-1-MGL2表达的酶纯度为81.4%,活性为0.305 2 IU/mg.结论 pGEX-4T-1-MGL1,pGEX-4T-1-MGL2都能表达蛋氨酸酶;pGEX-4T-1-MGL1表达的蛋氨酸酶纯度比较高,酶活性比较高.
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| 关 键 词： | 肿瘤 蛋氨酸酶 基因治疗 |
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