| 慢病毒载体介导不同内部启动子驱动绿色荧光蛋白表达效率 |
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| 引用本文： | 李振宇,徐开林,潘秀英,鹿群先,何徐彭,孙海英.慢病毒载体介导不同内部启动子驱动绿色荧光蛋白表达效率[J].江苏医药,2006,32(5):448-450,i0003. |
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| 作者姓名： | 李振宇 徐开林 潘秀英 鹿群先 何徐彭 孙海英 |
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| 作者单位： | 221002,徐州医学院附属医院血液病科 |
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| 摘 要： | 目的在人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)慢病毒载体中引入三种不同的内部启动子来驱动绿色荧光蛋白基因(GFP)的表达,初步比较内部启动子的效率。方法慢病毒载体三质粒系统中,转移质粒的构建采用限制性内切酶酶切、T4DNA连接酶连接方法和内切酶酶切鉴定。磷酸钙沉淀法将三质粒共转染293T包装细胞。病毒滴度的测定采用6孔板培养感染细胞,荧光显微镜计数GFP阳性细胞。通过荧光显微镜观察绿色荧光的表达情况判断启动子的效率。结果构建了含PPT元件和含不同内部启动子和GFP的质粒。转染293T细胞后均观察到较强的绿色荧光。表达荧光的293T细胞数以巨细胞病毒(CMV)启动子最多,肝细胞特异性启动子(LSP)较少,泛醌启动子(PUB)介于两者之间。CMV为内部启动子的慢病毒载体滴度5×106I U/ml,其他二种启动子的滴度(1~2)×105I U/ml。结论在所选择的三种内部启动子中,CMV启动子的效率最高,LSP较强,PUB介于两者之间。
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| 关 键 词： | 慢病毒载体 内部启动子 绿色荧光蛋白 |
| 收稿时间： | 2004-12-27 |
| 修稿时间： | 2004-12-27 |
Comparision of the efficiency of different internal promoters driving the expression of greeen fluorescent protein mediated by lentiviral vector |
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| LI Zhenyu,XU Kailin,PAN Xiuying,et al..Comparision of the efficiency of different internal promoters driving the expression of greeen fluorescent protein mediated by lentiviral vector[J].Jiangsu Medical Journal,2006,32(5):448-450,i0003. |
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| Authors: | LI Zhenyu XU Kailin PAN Xiuying |
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| Institution: | LI Zhenyu,XU Kailin,PAN Xiuying,et al.Department of Hematology,Affiliated Hospital,Xuzhou Medical College,Xuzhou 221002,CHINA |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Lentiviral vector Internal promoters Green fluorescent protein(GFP) |
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