| 人肽抗生素hPAB-β多拷贝串联基因工程菌的筛选及发酵研究 |
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| 引用本文： | 胡金川,汪正清,金晓琳,黎庶,谭银玲,李明,申晓冬,张椿,胡福泉,饶贤才. 人肽抗生素hPAB-β多拷贝串联基因工程菌的筛选及发酵研究[J]. 医学研究生学报, 2004, 17(3): 193-196 |
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| 作者姓名： | 胡金川 汪正清 金晓琳 黎庶 谭银玲 李明 申晓冬 张椿 胡福泉 饶贤才 |
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| 作者单位： | 第三军医大学微生物学教研室,重庆市微生物工程重点实验室,重庆,400038 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (批准号 :3 0 171119)，军队“十五”医药卫生重点课题 (批准号 :0 1Z0 70 )，国家“863”基金资助项目 (批准号 :2 0 0 2A2 14 2 11) |
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| 摘 要： | 目的：对已构建的人肽抗生素hPAB-β 1～8拷贝串联基因工程菌进行筛选，并对其优势菌株进行发酵研究，为hPAB-β的规模生产奠定基础。方法：对1～8拷贝串联基因工程菌的目标蛋白表达率进行比较后，选择2～5拷贝菌进行菌产量、目标蛋白表达率、包涵体溶解性、亲和层析效果比较，确定最佳多拷贝菌；对其摇瓶条件下发酵的培养液、温度、气体条件、IPTG诱导时机、浓度及时间进行研究。结果：在相同条件下，3拷贝菌产量(3．153g／L)最高，目标蛋白表达率(27．8％)接近最高水平，包涵体能溶解完全；利用亲和层析能成功捕获融合蛋白，后者经羟胺裂解，可获得相对分子质量与合成hPAB-β成熟肽大小相符的小肽，筛选出的优势菌传代稳定，其最佳摇瓶发酵条件为37℃，160r／min条件下，在改良M9-cAA培养液中培养至吸光值(A600)≈2．5时，以终浓度为100μmol／L的IPTG诱导表达5h。结论：确定了3拷贝菌为最佳多拷贝菌，并确定了其最佳摇瓶发酵参数。
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| 关 键 词： | 肽抗生素 hPAB-β 串联拷贝 发酵 |
| 文章编号： | 1008-8199(2004)03-0193-04 |
| 修稿时间： | 2003-10-18 |
Screening of recombinant bacterium for expression of human peptide antibiotic hPAB-β multimers and evaluation of its fermentation |
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| HU Jin-chuan,WANG Zheng-qing,JIN Xiao-lin,LI Shu,TAN Yin-ling,LI Ming,SHEN Xiao-dong,ZHANG Chun,HU Fu-quan,RAO Xian-cai. Screening of recombinant bacterium for expression of human peptide antibiotic hPAB-β multimers and evaluation of its fermentation[J]. Bulletin of Medical Postgraduate, 2004, 17(3): 193-196 |
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| Authors: | HU Jin-chuan WANG Zheng-qing JIN Xiao-lin LI Shu TAN Yin-ling LI Ming SHEN Xiao-dong ZHANG Chun HU Fu-quan RAO Xian-cai |
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