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VEGF特异siRNA对骨肉瘤细胞凋亡和仿血管发生的影响
引用本文:张立智,蔡宣松,钱志康,梅炯,黄煌渊,黄伟达.VEGF特异siRNA对骨肉瘤细胞凋亡和仿血管发生的影响[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2007,14(4):352-356.
作者姓名:张立智  蔡宣松  钱志康  梅炯  黄煌渊  黄伟达
作者单位:1. 同济大学,附属同济医院,骨科,上海,200065
2. 复旦大学,分子生物化学教研室,上海,200433
3. 同济大学,附属同济医院,骨科,上海,200065;复旦大学,附属华山医院,骨科,上海,200040
4. 复旦大学,附属华山医院,骨科,上海,200040
基金项目:国家自然科学基金;国家自然科学基金
摘    要:目的:探讨VEGF特异siRNA在骨肉瘤细胞株(MG63)增殖、凋亡以及仿血管发生中的作用。方法:以pSilienc-er载体构建VEGF特异siRNA质粒pSilencer-VEGF siRNA,并转染骨肉瘤细胞MG63;将细胞分为pSilencer-VEGF siRNA质粒组(试验组)和空siRNA质粒组(对照组),Western blotting在蛋白水平检测转染重组质粒后MG63细胞VEGF表达情况;MTT比色法、光镜、流式细胞仪结合Annexin V-FITC/PI染色和H-E染色观察质粒转染后骨肉瘤细胞增殖、凋亡和仿血管发生情况。结果:测序证实成功构建了针对VEGF的siRNA重组质粒。转染pSilencer-VEGF siRNA重组质粒后的试验组培养液中及骨肉瘤细胞内VEGF蛋白表达下降;转染后48、72、96h骨肉瘤细胞的增殖抑制率分别为41.67%、43.92%、35.32%,并发生了早期凋亡,凋亡率为28.27%。转染pSilencer-VEGF siRNA重组质粒的骨肉瘤细胞未见仿血管发生,转染空质粒的对照组骨肉瘤细胞则有仿血管发生。结论:RNA干扰VEGF基因能抑制骨肉瘤细胞增殖,促进骨肉瘤细胞早期凋亡,干扰骨肉瘤细胞仿血管发生,为临床基因治疗骨肉瘤提供了新的思路。

关 键 词:血管内皮生长因子  小干扰RNA  骨肉瘤细胞  仿血管发生  凋亡  增殖
文章编号:1007-385X(2007)04-0352-05
收稿时间:2007/3/13 0:00:00
修稿时间:2007-03-132007-06-04

Effects of vascular endothelial growth factor-siRNA on apoptosis and vasculogenic mimicry of osteosarcoma cells
ZHANG Li-zhi,CAI Xuan-song,QIAN Zhi-kang,MEI Jiong,HUANG Huang-yuan and HUANG Wei-da.Effects of vascular endothelial growth factor-siRNA on apoptosis and vasculogenic mimicry of osteosarcoma cells[J].Chinese Journal of Cancer Biotherapy,2007,14(4):352-356.
Authors:ZHANG Li-zhi  CAI Xuan-song  QIAN Zhi-kang  MEI Jiong  HUANG Huang-yuan and HUANG Wei-da
Institution:1. Department of Orthopaedics, Tongji Hospital, Tongji University, Shanghai 200065, China; 2. Department of Molecular Biochemistry, Fudan University, Shanghai 200433, China; 3. Department of Orthopaedics, Huashan Hospital, Fudan Uni- versity, Shanghai 200
Abstract:Objective: To study the role of vascular endothelial growth factor (VEGF)-siRNA in the proliferation, apoptosis, and vasculogenic mimicry of osteosarcoma cell line MG63. Methods: pSilencer vector was used to construct pSilencer-VEGF siRNA and the latter w
Keywords:vascular endothelial growth factor  small interfering RNA  osteosareoma cell  vasculogenie mimicry  apoptosis  proliferation
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