心房肌细胞移植修复重建窦房结功能的实验研究

目的通过制备犬的病态窦房结（病窦）综合征模型，研究心房肌细胞移植修复重建窦房结功能，构建生物起博器的可行性。方法用射频消融（n=5）及化学消融（n=3）的方法制备犬的病窦综合征模型。采用酶法及差速贴壁法分离纯化新生犬的右心房细胞（包括窦房结），4，6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）标记细胞核，移植前制备成单个心肌细胞悬液备用。在模型制备后4周，用微量注射器将1 ml细胞悬液多点注射至实验组的窦房结及其周围区域，对照组则单纯注射1 ml低糖培养液（L-DMEM）培养液，手术前后行电生理监测及组织学检查。结果消融窦房结后，出现了稳定的窦性心动过缓（110±10）次／min]。细胞移植后第5天实验组体表心电图显示较前明显增快，为（150±12）次／min左右，电生理检测窦房结恢复时间（SNRT）、校正窦房结恢复时间（CSNRT）及窦房传导时间（SACT）均有明显缩短，微电极记录显示其自发性搏动频率快于对照组。而对照组自始至终无明显改变。HE染色及免疫荧光检测均显示移植细胞与宿主细胞间连接蛋白43（Cx43）及N-钙黏素（N-cadherin）的表达。结论心房肌细胞移植构建生物起搏器具有可行性，提供了生物介入治疗的新途径。

Transplanted neonatal cardiomyocytes as a potential biological pacemaker in canines with sick sinus syndrome