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三七几丁质酶基因PnCHI1的克隆及表达特性分析
引用本文:许振宁,普丽梅,曲媛,杨野,白志伟,关瑞攀,张琦,崔秀明,刘迪秋. 三七几丁质酶基因PnCHI1的克隆及表达特性分析[J]. 中国中药杂志, 2016, 41(11): 2036-2043
作者姓名:许振宁  普丽梅  曲媛  杨野  白志伟  关瑞攀  张琦  崔秀明  刘迪秋
作者单位:昆明理工大学 生命科学与技术学院, 云南 昆明 650500,昆明理工大学 生命科学与技术学院, 云南 昆明 650500,昆明理工大学 生命科学与技术学院, 云南 昆明 650500,昆明理工大学 生命科学与技术学院, 云南 昆明 650500,昆明理工大学 生命科学与技术学院, 云南 昆明 650500,昆明理工大学 生命科学与技术学院, 云南 昆明 650500,昆明理工大学 生命科学与技术学院, 云南 昆明 650500,昆明理工大学 生命科学与技术学院, 云南 昆明 650500,昆明理工大学 生命科学与技术学院, 云南 昆明 650500
基金项目:国家自然科学基金项目(81560610);云南省应用基础研究计划项目(2013FA031,2014FA003)
摘    要:
几丁质酶(chitinase,EC3.2.1.14)广泛存在于多种生物体中,催化水解几丁质(chitin),在抗真菌防卫反应体系中具有重要作用,同时几丁质酶还调控植物的生长和发育,参与细胞的程序性死亡(programmed cell death,PCD)。该实验基于三七Panax notoginseng中编码几丁质酶的EST序列设计引物,采用快速扩增cDNA末端技术,克隆得到1个新的几丁质酶基因的全长cDNA序列,命名为PnCHI1。PnCHI1的cDNA全长为1 022 bp,含有822 bp的开放阅读框,26 bp 5'-非翻译区以及174bp的3'-非翻译区,编码具有273个氨基酸的蛋白质。该基因编码的蛋白属于糖苷水解酶19家族成员,进化树分析表明PnCHI1编码的氨基酸序列属于IV类几丁质酶。qRT-PCR分析结果显示,植物信号分子水杨酸、茉莉酸甲酯、H_2O_2和乙烯处理可均明显诱导三七根中PnCHI1的转录水平;三七叶片接种人参链格孢Altemaria panax后,PnCHI1的表达量迅速升高,呈波动上升趋势;外源茉莉酸甲酯预处理三七根部,PnCHI1的表达水平上升,接种茄腐镰刀菌Fusarium solani后,PnCHI1的转录水平急剧上升,接种后4 h达到最高转录水平;而无菌水预处理三七受茄腐镰刀菌侵染过程中,PnCHI1的表达量逐渐上升,至48h达到最大值。上述结果表明PnCHI1参与三七对根腐病菌以及黑斑病菌的防卫反应。

关 键 词:三七  几丁质酶  基因克隆  茄腐镰刀菌  人参链格孢  防卫反应
收稿时间:2016-01-19

Cloning and expression analysis of a chitinase gene PnCHI1 from Panax notoginseng
XU Zhen-ning,PU Li-mei,QU Yuan,YANG Ye,BAI Zhi-wei,GUAN Rui-pan,ZHANG Qi,CUI Xiu-ming and LIU Di-qiu. Cloning and expression analysis of a chitinase gene PnCHI1 from Panax notoginseng[J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2016, 41(11): 2036-2043
Authors:XU Zhen-ning  PU Li-mei  QU Yuan  YANG Ye  BAI Zhi-wei  GUAN Rui-pan  ZHANG Qi  CUI Xiu-ming  LIU Di-qiu
Affiliation:Faculty of Life Science and Technology, Kunming University of Science and Technology, Kunming 650500, China,Faculty of Life Science and Technology, Kunming University of Science and Technology, Kunming 650500, China,Faculty of Life Science and Technology, Kunming University of Science and Technology, Kunming 650500, China,Faculty of Life Science and Technology, Kunming University of Science and Technology, Kunming 650500, China,Faculty of Life Science and Technology, Kunming University of Science and Technology, Kunming 650500, China,Faculty of Life Science and Technology, Kunming University of Science and Technology, Kunming 650500, China,Faculty of Life Science and Technology, Kunming University of Science and Technology, Kunming 650500, China,Faculty of Life Science and Technology, Kunming University of Science and Technology, Kunming 650500, China and Faculty of Life Science and Technology, Kunming University of Science and Technology, Kunming 650500, China
Abstract:
Keywords:Panax notoginseng  chitinases  gene cloning  Fusarium solani  Altemaria panax  defense response
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