梅毒螺旋体体内诱生抗原Tp0462的表达鉴定及在临床血清学诊断中的应用评价 |
| |
引用本文: | 刘文,邓美霞,张晓红,赵铁,罗茜,赵飞骏,尹卫国.梅毒螺旋体体内诱生抗原Tp0462的表达鉴定及在临床血清学诊断中的应用评价[J].中华皮肤科杂志,2018,51(5):352-357. |
| |
作者姓名: | 刘文 邓美霞 张晓红 赵铁 罗茜 赵飞骏 尹卫国 |
| |
作者单位: | 1. 南华大学病原生物研究所/特殊病原体防控湖南省重点实验室2. 南华大学病原生物学研究所3. 湖南省衡阳市 南华大学医学院病原生物学研究所4. 汕头大学医学院附属粤北人民医院检验科 |
| |
基金项目: | 国家自然科学基金;国家自然科学基金;广东省科技厅课题;湖南省教育厅创新平台开放基金 |
| |
摘 要: | 目的 筛选鉴定并评价梅毒螺旋体(Tp)体内诱生抗原Tp0462的临床血清学诊断价值。方法 提取Tp Nichols株全基因组,PCR扩增Tp0462,克隆构建重组质粒pET30a(+)?Tp0462,转化至E.coli Rosetta(DE3)菌,大量诱导表达重组蛋白Tp0462并纯化、鉴定。18只新西兰兔随机平均分为活Tp接种组、紫外线照射灭活Tp接种组和未接种对照组,接种后不同时间点抽血分离血清,用ELISA鉴定Tp0462蛋白的体内诱生性特点。ELISA法(Tp0462?ELISA)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)、梅毒初筛ELISA试验及快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)试验检测336份临床梅毒患者血清样本,初步评价该蛋白的诊断价值。结果 重组质粒Tp0462?pET30a(+)在E.coli Rosetta(DE3)中最适的表达条件为0.5 mmol/L IPTG,20 ℃,180 rpm摇床诱导培养4 h。活Tp接种组血清Tp0462特异性抗体水平从第2周起呈急剧上升趋势,至5周后趋于平稳,而灭活Tp接种组及未接种对照组血清Tp0462特异性抗体水平一直处于低水平。活Tp接种组Tp0462特异性抗体水平显著高于灭活Tp接种组及未处理组(P < 0.05),而灭活Tp接种组与未处理组相比,差异无统计学意义(P = 0.256)。活Tp接种组、灭活Tp接种组Tp92抗体水平显著高于未处理组(P < 0.05),而活Tp接种组与灭活Tp接种组差异无统计学意义(P = 0.127)。与TPPA相比,Tp0462?ELISA的灵敏度和特异度分别为91.7%和98.8%,符合率为95.2%,曲线下面积为0.997。Tp0462?ELISA与梅毒初筛ELISA试验的符合率为92.3%,Kappa值为0.846;与RPR试剂盒的符合率为83.9%,Kappa值为0.293。结论 Tp0462在梅毒血清学诊断中具有较高的灵敏度和特异度,可以作为潜在的梅毒诊断候选蛋白。
|
关 键 词: | 梅毒 苍白密螺旋体 梅毒血清诊断 体内诱生抗原 Tp0462 |
收稿时间: | 2017-03-27 |
|
| 点击此处可从《中华皮肤科杂志》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《中华皮肤科杂志》下载免费的PDF全文 |