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抗人蛋白酶激活受体3单克隆抗体的制备与鉴定
引用本文:易婷婷,何韶衡,陈霖菲,黄阗,付意玲,方泽漫.抗人蛋白酶激活受体3单克隆抗体的制备与鉴定[J].郑州大学学报(医学版),2007,42(6):1082-1085.
作者姓名:易婷婷  何韶衡  陈霖菲  黄阗  付意玲  方泽漫
作者单位:1. 汕头大学医学院变态反应学与炎症学研究所,汕头,515031
2. 南京医科大学第一附属医院中心实验室,南京,210029
基金项目:广东省自然科学基金 , 广东省科技厅科技计划
摘    要:目的:制备并鉴定抗人蛋白酶激活受体3(PAR3)单克隆抗体(mAb).方法:以人PAR3为免疫原免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗PAR3 mAb.采用捕获ELISA法鉴定mAb的Ig亚类;通过ELISA、流式细胞分析、激光共聚焦显微镜技术、免疫组织化学染色法、斑点杂交技术鉴定mAb的特异性.结果:获得2株可稳定分泌抗人PAR3 mAb的杂交瘤细胞,其分泌的mAb均为IgM.斑点杂交技术分析表明,其mAb能与PAR3抗原有效结合.免疫组织化学染色表明,mAb与肺组织中的巨噬细胞、结肠组织中的淋巴细胞及疑似肥大细胞、扁桃体和包皮组织中的淋巴细胞的反应呈阳性.流式细胞仪分析及激光共聚焦显微镜观察显示,2株mAb与人肺腺癌A549细胞胞内及膜上的PAR3均呈阳性反应.结论:成功地制备抗PAR3 mAb,为变态反应性和炎症性疾病的研究提供了有用的试剂.

关 键 词:人蛋白酶激活受体3  单克隆抗体  特性鉴定
修稿时间:2007-02-05

Preparation and identification of monoclonal antibodies against human proteinase-activated receptor-3
YI Tingting,HE Shaoheng,CHEN Linfei,HUANG Tian,FU Yiling,FANG Zeman.Preparation and identification of monoclonal antibodies against human proteinase-activated receptor-3[J].Journal of Zhengzhou University: Med Sci,2007,42(6):1082-1085.
Authors:YI Tingting  HE Shaoheng  CHEN Linfei  HUANG Tian  FU Yiling  FANG Zeman
Abstract:
Keywords:human proteinase-activated receptor-3  monoclonal antibody  characterization
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