| p53基因的原核表达与活性测定 |
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| 引用本文： | 李春炎,杨兵,李兴玉,俞亚东. p53基因的原核表达与活性测定[J]. 医学研究杂志, 2009, 38(1) |
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| 作者姓名： | 李春炎 杨兵 李兴玉 俞亚东 |
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| 作者单位： | 上海师范大学生命与环境科学学院生物系,200234 |
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| 摘 要： | ![]()
目的 原核表达P53重组蛋白,检测P53蛋白对人类白血病细胞系K562增生的影响.方法 运用PCR技术鉴定了pET-p53重组质粒导人BL21菌株中p53基因的存在,并在IPTG的诱导下,大量产生外源基因产物.通过Ni-NAT亲和层析柱纯化分离P53蛋白,SDS-PAGE确定该蛋白准确性.以不同浓度的P53重组蛋白诱导K562细胞后,用MTT比色法、集落形成法、流式细胞术(FCM)测定P53蛋白对靶细胞增生的影响.结果 成功地构建了含人野生型p53基因的原核表达载体,纯化了P53重组蛋白.活性测定结果表明,随着P53重组蛋白浓度的增加,K562细胞存活率显著降低,并发现该蛋白能促进肿瘤细胞凋亡,且呈现明显的剂量依赖性,经相关分析,细胞抑制率与P53蛋白浓度呈正相关(r=0.8981),其半数抑制浓度(IC50)为6.74μg/ml.结论 P53重组蛋白具有促进K562细胞凋亡的作用.
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| 关 键 词： | p53基因 细胞凋亡 |
Cloning and Expression of p53 Gene and its Activity Assay |
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| Li Chunyan,Yang Bing,Li Xingyu,Yu Yadong. Cloning and Expression of p53 Gene and its Activity Assay[J]. Journal of Medical Research, 2009, 38(1) |
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| Authors: | Li Chunyan Yang Bing Li Xingyu Yu Yadong |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | K562 FCM |
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