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| 异种移植动物模型-转人CD59 cDNA首建小鼠的培育 | |
| 作者姓名： | 王磊 李志伟 张同琳 林爱星 陈永福 |
| 作者单位： | 徐州市第一人民医院普外科 江苏徐州221002(王磊)，北京大学第三医院普外科 北京100085(李志伟，张同琳)，中国农业大学生物技术国家重点实验室 北京100000(林爱星)，中国农业大学生物技术国家重点实验室 北京100000(陈永福) |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助课题 (3 9770 764 ) |
| 摘 要： | 目的 培育转人CD5 9cDNA首建小鼠 ,以进一步研究异种移植 ,并为建立鼠系奠定基础。方法 构建转基因结构pEGFP -C1-OMT -CD5 9,限制性内切酶切除质粒载体 ,回收、纯化包括人CD5 9cDNA、绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein ,GFP)基因及各自启动子的约 3 .3kb的基因片段 ,用显微注射法将此片段注入小鼠受精卵 ;提取F0 代小鼠尾组织DNA ,用PCR法初选 ,再用Southern杂交法对PCR阳性鼠进一步筛选 ,确定阳性转基因首建小鼠。结果 共注射 5 90枚受精卵 ,移植于 2 4只受体母鼠中 ,出生F0 代小鼠 73只 ;PCR初选有 8只呈阳性(6♂∶2♀ ) ,Southern杂交有 2只呈阳性 (1♂∶1♀ ) ;经粗略估算 ,整合外源基因拷贝数分别为 3和 10。结论 成功地培育出转人CD5 9cDNA首建小鼠 ,用PCR和Southern杂交法证实了外源片段的整合 |
| 关 键 词： | 移植 异种 CD59蛋白 转基因小鼠 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ | |