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前列腺特异抗原3慢病毒表达载体的构建与包装
引用本文:刘晓军,王娜,姚旭东,曹达龙. 前列腺特异抗原3慢病毒表达载体的构建与包装[J]. 中国癌症杂志, 2013, 23(11): 857-862. DOI: 10.3969/j.issn.1007-3969.2013.11.001
作者姓名:刘晓军  王娜  姚旭东  曹达龙
作者单位:1.复旦大学附属肿瘤医院泌尿外科,复旦大学上海医学院肿瘤学系,上海 200032;2.复旦大学附属肿瘤医院肿瘤研究所,复旦大学上海医学院肿瘤学系,上海200032
基金项目:国家自然科学基金(No:81272836);上海市科学技术委员会上海市自然科学基金(No:11ZR1407400);上海市科学技术委员会上海市医学引导类项目(No:114119a4200)
摘    要:背景与目的:前列腺癌抗原3(prostate cancer antigen 3,PCA3)作为一种长链非编码RNA(lncRNA)已被证实在前列腺癌中高度特异性表达,暗示其可能在前列腺癌中发挥重要作用,为深入研究,我们将完整的PCA3基因转入真核表达载体,并构建慢病毒包装系统。方法:从前列腺癌细胞株LNCaP细胞中提取总RNA,运用重叠延伸方法扩增到PCA3基因,测序正确后定向接入真核表达载体pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP,酶切鉴定并测序正确后进行慢病毒包装和滴度测定。结果:经PCR鉴定及测序,PCA3表达质粒序列与Gene Bank序列进行Blast比对分析,同源性为99.8%,PCA3慢病毒滴度测定为2×108。结论:PCA3成功插入真核表达载体并完成了慢病毒包装,为深入研究PCA3基因在前列腺细胞中的作用奠定了基础,进而为探索前列腺癌的治疗提供了新的途径。

关 键 词:前列腺癌  前列腺癌抗原3  真核表达载体  慢病毒  

Construction of eukaryotic expression vector and package of lentivirus vector encoding prostate cancer antigen 3
LIU Xiao-jun,WANG Na,YAO Xu-dong,CAO Da-long. Construction of eukaryotic expression vector and package of lentivirus vector encoding prostate cancer antigen 3[J]. China Oncology, 2013, 23(11): 857-862. DOI: 10.3969/j.issn.1007-3969.2013.11.001
Authors:LIU Xiao-jun  WANG Na  YAO Xu-dong  CAO Da-long
Affiliation:1.Department of Urology, Fudan University Shanghai Cancer Center, Department of Oncology, Shanghai Medical College Fudan University, Shanghai 200032, China;2.Department of Cancer Institute, Fudan University Shanghai Cancer Center, Department of Oncology, Shanghai Medical College Fudan University, Shanghai 200032, China
Abstract:
Keywords:Prostate cancer  Prostate cancer antigen 3  Eukaryotic expression vector  Lentivirus  
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