| 人前脑啡肽基因修饰人胚胎肾细胞的构建 |
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| 引用本文： | 白凤,杨保仲,薛朝霞,潘喻飞,黄平. 人前脑啡肽基因修饰人胚胎肾细胞的构建[J]. 中华麻醉学杂志, 2012, 32(6) |
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| 作者姓名： | 白凤 杨保仲 薛朝霞 潘喻飞 黄平 |
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| 作者单位： | 山西医科大学第一临床医学院麻醉科, 太原市,030001 |
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| 摘 要： | 目的 构建人前脑啡肽基因(hPPE)修饰的人胚胎肾细胞(HEK293细胞).方法 重组质粒pcDNA3.1(+)/hPPE经限制性内切酶HindⅢ和Not Ⅰ进行双酶切获得hPPE基因,运用基因重组技术将hPPE基因与表达载体同源重组,转染293T细胞进行慢病毒包装、扩增、纯化,测定病毒滴度,再将重组的慢病毒载体转染HEK293细胞.用Western blot法检测hPPE基因在HEK293细胞中的表达.结果 重组慢病毒载体阳性克隆测序结果和基因库的hPPE基因序列完全一致.含有hPPE基因的慢病毒载体,滴度为2.07×108TU/ml.转染慢病毒载体后的HEK293细胞,在荧光显微镜下未见到GFP荧光.转染Ubc-GFP-L.V.空病毒载体的HEK293细胞,可见到较强的荧光.Western blot法检测到经慢病毒载体转染后的HEK293细胞中hPPE基因表达呈阳性.结论 成功构建了hPPE基因修饰的HEK293细胞,使hPPE基因可在HEK293细胞中稳定表达.
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| 关 键 词： | 脑啡肽类 细胞系 生物,基因修饰 基因疗法 |
Construction of human embryonic kidney cells exhibiting human preproenkephalin gene expression |
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| BAI Feng , YANG Bao-zhong , XUE Zhao-xia , PAN Yu-fei , HUANG Ping. Construction of human embryonic kidney cells exhibiting human preproenkephalin gene expression[J]. Chinese Journal of Anesthesilolgy, 2012, 32(6) |
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| Authors: | BAI Feng YANG Bao-zhong XUE Zhao-xia PAN Yu-fei HUANG Ping |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Enkephalins Cell line Organisms,genetically modified G ene therapy |
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