丹参酮ⅡA对心肌细胞肥大及凋亡的影响

目的：在原代培养的新生大鼠心肌细胞上，观察丹参酮ⅡA对血管紧张紊Ⅱ诱导的心肌细胞肥大、凋亡的影响。方法：实验于2005-06／2005-09在华中科技大学同济医学院急诊科实验室完成。实验选用Wistar乳鼠12只。胰酶消化，差数贴壁法体外分离培养大鼠心肌细胞。于心肌细胞培养的第4天，换无血清的DMEM培养基，再培养1d，随机分为4组加入不同的干预因素：对照组，血管紧张素Ⅱ（1&;#215;10^-4mol／L）＋丹参酮ⅡA（1&;#215;10^-5mol／L），丹参酮ⅡA（1&;#215;10^-5mol／L），血管紧张素Ⅱ（1&;#215;10^-6mol／L）。采用相差显微镜测量细胞大小，测定心肌细胞^3H-亮氨酸掺入作为心肌细胞肥大的指标；用流式细胞仪测定心肌细胞凋亡率，用逆转录聚合酶链式反应检测心肌细胞凋亡基因FasmRNA的表达。结果：①血管紧张素Ⅱ作用7d，血管紧张素Ⅱ组心肌细胞直径明显大于对照组[（29．2&;#177;3．1），（19．9&;#177;1．8）μm；t=4．244，P〈0．01]；丹参酮ⅡA抑制血管紧张紊Ⅱ介导的心肌细胞直径增大，与血管紧张素Ⅱ组相比差异有显著性[（21．3&;#177;2．7）μm，t=3．046，P〈0．05]。②血管紧张素Ⅱ作用24h后，血管紧张素Ⅱ组心肌细胞合成速率较对照组明显增加[（1951&;#177;141）。（1123&;#177;121）min；t=7．067，P〈0．01]；丹参酮ⅡA对心肌细胞蛋白质合成没有影响，但能抑制血管紧张素Ⅱ刺激的心肌蛋白质合成速率的增加[（1198&;#177;123），（1951&;#177;141）min^-1；t=6．378，〈0．01]。（3）血管紧张素Ⅱ作用48h后，心肌细胞凋亡率血管紧张素Ⅱ组较对照组明显增加[（35．4&;#177;2．6）％。（17．7&;#177;1．5）％；t=9．653，P〈0．01]；丹参酮ⅡA能抑制血管紧张紊Ⅱ刺激的心肌凋亡率的增加[（23．2&;#177;2．4）％，t=5，456，P〈0．01]。④在培养液中加入血管紧张素Ⅱ作用12h后，心肌细胞FasmRNA表达较对照组明显增加[（0．890&;#177;0．104），（0.291&;#177;0．043）；t=9，112，P〈0.01]，预先加入丹参酮ⅡA作用30min，可阻断血管紧张素Ⅱ的作用[（0．358&;#177;0．063），（0．890&;#177;0．104）；t=7．123，P〈0．01]。结论：丹参酮ⅡA可以抑制由于血管紧张索Ⅱ诱导的心肌细胞直径、心肌蛋白质合成速率及凋亡率的增加。降低凋亡基因FasmRNA的表达。