| 生物素化的HLA-A*2402-抗原肽复合物的制备 |
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| 引用本文： | 卢小玲,吴雄文,翁秀芳,李青,梁智辉,龚非力.生物素化的HLA-A*2402-抗原肽复合物的制备[J].免疫学杂志,2006,22(1):78-81. |
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| 作者姓名： | 卢小玲 吴雄文 翁秀芳 李青 梁智辉 龚非力 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院免疫学系,武汉,430030 |
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| 基金项目： | 中国科学院资助项目;科技部科研项目 |
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| 摘 要： | 目的 制备生物素化的HLA-A＊2402-抗原肽复合物。方法 将原核高效表达的sHLA-A＊2402-BSP融合蛋白及β2m和HLA-A＊2402限制性抗原肽EB病毒BRLF1蛋白中的九肽NH2-TYPVLEEMF-COOH进行稀释、复性、折叠，形成HLA—A＊2402-抗原肽复合物单体，并在BirA酶作用下进行生物素化，使生物素结合到HLA-A＊2402-抗原肽复合物中H链C端的BSP序列上形成生物素化的sHLA—A＊2402-抗原肽复合物单体。利用特异性单克隆克体（W6／32和兔抗人β2微球蛋白抗体）及链霉亲合素进行ELISA和Westem blot，检测稀释复性和生物素化的折叠产物。结果 折叠复合物中，主要含有HLA—A＊2402-肽复合物单体及β2两种成分，其中HLA-A＊2402-肽复合物单体可生物素化。结论 成功制备出生物素化的HLA—A＊2402-抗原肽复合物单体，为进一步构建四聚体及制备人工抗原提呈细胞奠定了基础。
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| 关 键 词： | HLA-A*2402-抗原肽复合物 生物素化 BirA酶 |
| 文章编号： | 1000-8861（2006）01-0078-04 |
| 收稿时间： | 2004-09-20 |
| 修稿时间： | 2004-12-12 |
Preparation of biotinylated HLA-A * 2402-peptide complex |
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| LU Xiao-ling,WU Xiong-wen,WENG Xiu-fang,LI qing,LIANG Zhi-hui,GONG Fei-li.Preparation of biotinylated HLA-A * 2402-peptide complex[J].Immunological Journal,2006,22(1):78-81. |
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| Authors: | LU Xiao-ling WU Xiong-wen WENG Xiu-fang LI qing LIANG Zhi-hui GONG Fei-li |
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| Institution: | Department of Immunology, Tonaji Medical College, Huanzhong Science and Technology University, Wuhan 430030, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | HLA-A*2402-peptide complex Biotinylation BirA enzyme |
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