肺结核患者血清外泌体中差异表达的微小RNAs及其功能分析

目的:探究肺结核患者血清外泌体中差异表达的微小RNAs(miRNAs)及其功能。方法:分子排阻法和超滤离心法提取纯化实验组及对照组血清外泌体，粒径检测、透射电镜和Western blot进行鉴定，miRNeasy Micro Kit提取外泌体总RNA;Illumina HiSeq2500高通量测序检测miRNAs表达谱；生物信息学分析实验组和对照组差异表达的miRNAs并预测其靶基因及其靶基因潜在功能。结果:分子排阻和超滤离心获得的微囊泡直径为30～100 nm、形态完整、球形、大小较为均一，表达蛋白TSG101、HSP70、CD63、Calnexin无表达。高通量测序分析显示，实验组显著差异表达的miRNAs共63个，其中32个上调表达，31个下调表达。GO富集分析显示差异表达的miRNAs靶基因生物学过程方面主要富集于细胞组织代谢，细胞组分方面主要富集于细胞器和细胞质，分子功能方面主要富集于催化活性、核酸结合转录因子活性。KEGG富集分析显示差异表达的miRNAs可显著富集于肾素-血管紧张素系统(RAS)、转化生长因子(TGF)、环腺苷酸单磷酸-蛋白激酶A(cGMP-PKG)等信号...