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视网膜色素上皮细胞氧化应激相关microRNA的鉴定
引用本文:梁厚成,陈凌,冯海晓,何玲,姚亮,柏凌.视网膜色素上皮细胞氧化应激相关microRNA的鉴定[J].国际眼科杂志,2015,15(9):1521-1524.
作者姓名:梁厚成  陈凌  冯海晓  何玲  姚亮  柏凌
作者单位:中国陕西省西安市,西安交通大学第二附属医院眼科; 中国陕西省西安市第一医院眼科;中国陕西省西安市,西安交通大学第二附属医院眼科;中国陕西省西安市,西安交通大学第二附属医院眼科;中国陕西省西安市,西安交通大学第二附属医院眼科;中国陕西省西安市,西安交通大学第二附属医院眼科;中国陕西省西安市,西安交通大学第二附属医院眼科
基金项目:国家自然科学基金青年基金项目(No.30901644)
摘    要:目的:应用miRNA表达谱芯片筛选视网膜色素上皮细胞与氧化应激相关的miRNA,为更加全面深入地研究年龄相关性黄斑病变(age-related macular degeneration,AMD)发生的分子机制提供新的思路。

方法:培养D407细胞,分别使用100、200、400μmol/L H2O2处理细胞24h后,Trizol试剂抽提细胞总RNA,使用Exiqon miRCURY LNATM microRNA表达谱芯片(miRBase 16.0数据库)检测不同浓度处理后D407细胞miRNA的表达差异,并将不同浓度处理后的变化进行聚类分析。使用Stem loop realtime PCR对芯片结果进行验证,并运用生物信息学方法预测差异miRNA调控的靶基因。

结果:芯片所包含的1 425个已知miRNA中,共有367个在不同浓度H2O2处理后表达发生变化。通过Treeview软件进行聚类分析发现miR-31等17个miRNA随H2O2浓度的升高呈现逐渐降低的趋势,miR-206等7个则逐渐升高。PCR验证显示芯片结果准确性较好。

结论:H2O2作用前后RPE的miRNA表达存在明显差异,miRNA作为转录后水平的调节分子,参与了细胞氧化应激反应,可能在AMD的发生发展中起有重要作用。

关 键 词:氧化应激    视网膜色素上皮细胞    miRNA    年龄相关性黄斑变性
收稿时间:6/8/2015 12:00:00 AM
修稿时间:2015/8/17 0:00:00

Identification of oxidative stress related microRNA in human retinal pigment epithelium
Hou-Cheng Liang,Ling Chen,Hai-Xiao Feng,Ling He,Liang Yao and Ling Bai.Identification of oxidative stress related microRNA in human retinal pigment epithelium[J].International Journal of Ophthalmology,2015,15(9):1521-1524.
Authors:Hou-Cheng Liang  Ling Chen  Hai-Xiao Feng  Ling He  Liang Yao and Ling Bai
Institution:Department of Ophthalmology, the Second Affiliated Hospital of Xi'an Jiaotong University, Xi'an 710004, Shaanxi Province, China; Department of Ophthalmology, Xi'an No.1 Hospital, Xi'an 710002, Shaanxi Province, China;Department of Ophthalmology, the Second Affiliated Hospital of Xi'an Jiaotong University, Xi'an 710004, Shaanxi Province, China;Department of Ophthalmology, the Second Affiliated Hospital of Xi'an Jiaotong University, Xi'an 710004, Shaanxi Province, China;Department of Ophthalmology, the Second Affiliated Hospital of Xi'an Jiaotong University, Xi'an 710004, Shaanxi Province, China;Department of Ophthalmology, the Second Affiliated Hospital of Xi'an Jiaotong University, Xi'an 710004, Shaanxi Province, China;Department of Ophthalmology, the Second Affiliated Hospital of Xi'an Jiaotong University, Xi'an 710004, Shaanxi Province, China
Abstract:
Keywords:oxidative stress  retinal pigment epithelium  microRNA  age-related macular degeneration
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